貴州省藍莓主栽區(qū)真菌病害調查初報.pdf

收稿日期 : 2017 06 19; 修回日期 : 2017 11 01基金項目 :“藍莓有害生物綠色防控關鍵技術研究及應用 ”( 黔科合重大專項字 2015 6013 2) ; “高叢藍莓產業(yè)化高效栽培技術研究及示范 ”( 黔科院 SY 字 2016 03 號 1) ; “貴州省藍莓工程技術研究中心建設 ”( 黔科合平臺人才 20165202 號 )第一作者 : 任春光 ( 1981) ， 女 ， 土家族 ， 貴州印江人 ， 碩士 ， 副研究員 ， 主要從事真菌資源及真菌病害研究 ， E-mail:408558682 qq com通信作者 : 聶飛 ， 研究員 ， E-mail: 1134477929 qq com。貴州省藍莓主栽區(qū)真菌病害調查初報任春光1， 2， 楊豐2， 黃振興1， 2， 劉曼1， 2， 聶飛1， 2( 1. 貴州省生物研究所 ， 貴州 貴陽 550009; 2. 麻江藍莓產業(yè)工程技術中心 ， 貴州 麻江 557602)摘要 : 20152017 年作者采用隨機普查和定點調查方式調查貴州省藍莓 Vaccinium sp 主要栽培區(qū)病害種類 。結果發(fā)現(xiàn) : 貴州藍莓葉 、莖 、花共有 7 種真菌病害 ， 其中藍莓褐斑病 ( Pseudocercosporasp ) 、藍莓炭疽病 ( Colletotrichum sp ) 、藍莓莖枯病 ( Ophiobolus sp ) 、藍莓枯萎病 ( Phomopsis sp ) 值得后期密切關注 。關鍵詞 : 藍莓 ; 真菌病害 ; 調查 ; 危害評價中圖分類號 : S763. 15 文獻標志碼 : A 文章編號 : 1671 0886( 2018) 02 0022 06Preliminary investigation of fungal diseases of blueberry in major cultivation areas of Guizhouprovince/EN Chunguang， et al ( Guizhou Institute of Biology， Guiyang 550009， China)Abstract: Fungal diseases of blueberry in major cultivation areas of Guizhou province were investigatedwith random and point surveys from 2015 to 2017 The results showed that there were seven fungal dis-eases on leaf， stem and flower of blueberry in Guizhou province， in which brown spot ( Pseudocercos-pora sp ) ， anthracnose ( Colletotrichum sp ) ， stem blight ( Ophiobolus sp ) and wilt disease ( Pho-mopsis sp ) should be paid close attention toKey words: blueberry; fungal disease; investigation; hazard evaluation藍莓 Vaccinium sp 又稱藍漿果或越桔 ， 屬多年生灌木型小漿果果樹 ， 果實呈藍色 ， 是杜鵑花科 Eri-caceae 越橘屬 Vaccinium 植物 。因果實中含有豐富的花青素 ， 具有獨特的食用營養(yǎng)與保健作用 ， 聯(lián)合國糧農組織將其列為人類五大健康食品之一 。貴州境內山巒重疊 ， 丘陵起伏 ， 地勢變化大 ， 形成了明顯的地區(qū)性氣候差異 。貴州發(fā)展藍莓具有得天獨厚的自然條件優(yōu)勢 ， 從 2000 年開始引種兔眼藍莓 ， 至今已有 17 年栽培歷史 ， 先后引入了四類 40 多個品種 1 2， 貴州的麻江 、黃平 、丹寨 、鳳岡 、松桃 、獨山 、花溪和烏當?shù)?20 個縣區(qū)進行了栽培種植 。近年來隨著藍莓種植面積持續(xù)增長 、對外引種頻繁 ， 病害種類隨之增多 ， 發(fā)病程度日趨嚴重 。為了摸清貴州省藍莓葉 、莖 、花真菌病害種類 ， 有效控制病害的發(fā)生 ， 保持藍莓良好的生長狀態(tài) ， 提高生產效益 ， 我們對藍莓真菌病害種類進行了系統(tǒng)調查 。1 材料與方法1. 1 標本采集 20152017 年 ， 采用隨機普查和定點調查方式分別在貴州麻江 、黃平 、丹寨 、鳳岡 、松桃等地的藍莓主要栽培區(qū)調查病害種類 ， 采集癥狀典型的新鮮病株供室內鑒定 。1. 2 病原真菌分離及鑒定 根據真菌病害發(fā)生部位和形式 ， 針對性采用不同方法分離病原 。每份材料重復 3 次 ， 取藍莓基地健康植株組織作空白對照 。對于癥狀明顯 ， 病原菌用肉眼可見的病害 ， 在解剖鏡下用無菌接種針直接從病部挑取病原菌放在無菌水中 ， 混合均勻后 ， 再吸取少量菌液在水瓊脂培養(yǎng)基 ( 15 g 瓊脂 ， 1 000 mL) 上 ， 等待萌發(fā)后挑取單孢進行多次純化獲得純培養(yǎng) 。對于癥狀明顯但病原菌無法用肉眼看見的病害 ， 采取組織分離法 ， 取新鮮病健交界處的病組織洗凈后切成 4 mm 4 mm 小塊 ， 用滅菌水沖洗 3 422 Forest Pest and Disease Mar 2018 No2次 ; 分別用 75%酒精消毒 30 s 左右 ， 再在 0. 1%升汞中消毒 1 2 min， 然后用無菌水沖洗 3 4 次 ， 在無菌條件下將感病組織接在 PDA 培養(yǎng)基 3的平板上 。1. 3 致病性測定 對疑難病害用柯赫氏法則進行致病性測定 3 4。將純化所得的菌株配成孢子懸浮液 ， 每視野 50 60 個孢子 ( 10 16 倍 ) ， 以刺傷和無傷接種法 ， 把孢子液涂于新鮮健康的離體寄主上 ; 以無菌水保濕作對照 ( CK) ， 然后將接種的葉片或枝條放入無菌濕潤濾紙的培養(yǎng)皿中 ， 置于 25 溫箱內保濕培養(yǎng) ， 每處理 3 個重復 ， 每隔 2 d 觀察 1 次 ， 記錄接種結果 ， 并對接種成功的病斑進行組織分離 ， 確認致病菌株 5。根據病原菌形態(tài)特征 ， 參照魏景超 5( 1979)真菌鑒定手冊 和陸家云 4( 2001) 植物病原真菌學 ， 按照 Ainsworth 分類系統(tǒng) ， 參考有關文獻 6 8，初步鑒定貴州藍莓病害的病原真菌 。2 結果與分析2. 1 藍莓褐斑病癥狀 褐斑病主要危害葉片 ， 葉片受害初期產生棕褐色小點 ， 邊緣有卷起 ， 后期隨著病斑擴大 ， 邊緣褐色至紅褐色 ， 病健交界清楚 ， 斑點生于葉正面 ， 形狀不規(guī)則 ， 多個病斑融合成不規(guī)則大斑 ( 圖 1a) 。病原菌 假尾孢菌 Pseudocercospora sp。分生孢子梗多根 ， 直立或稍彎曲 ， 灰褐色 ， 有隔膜 ， 分枝 。分生孢子棍棒形 、呈曲膝狀 、淺褐色 、多數(shù)稍彎曲 ， 兩端鈍圓 ， 通常有 3 6 個隔膜 ，( 20 80) m ( 2 9) m， 符合假尾孢菌屬 Pseudocercospora 的形態(tài)描述 ( 圖 1b) 。分布及危害評價 假尾孢屬 Pseudocercosporasp 在世界各地廣泛發(fā)生 ， 如美國 、英格蘭 、澳大利亞 、韓國等均有報道 8， 在中國的東北 、重慶 、北京 、貴州等其它植物上發(fā)現(xiàn)過假尾孢屬病原菌 7 9。假尾孢病原菌在貴州的獼猴桃上有報道 ， 主要危害葉片 ， 引起干枯后卷曲 ， 落葉 ， 嚴重影響植物光合作用 7。該屬是植物病原菌 ， 可危害蔬菜 、花卉 、經濟林木 、中藥材等多種植物 ， 是非常重要的病原菌 。引起葉片枯焦 ， 提前脫落 ， 或造成落花 、落果 ， 影響產量和品質 ， 常造成一定的經濟損失 ， 假尾孢屬有些種引起的病害甚至被列在檢疫法規(guī)中成為檢疫對象 。目前藍莓褐斑病發(fā)病率為 10% 15%， 在藍莓上未見此病原菌報道 。因為藍莓褐斑病對藍莓生產可能造成相當大的經濟損失 ， 嚴重時甚至可以導致絕收 ， 因此不能輕視藍莓褐斑病的危害 ， 應作為后期重點觀察病害之一 ; 定點觀察藍莓褐斑病害的發(fā)生發(fā)展規(guī)律 ， 加強室內生物源藥劑篩選試驗 ， 為預防病害進一步蔓延打下前期基礎 。圖 1 藍莓褐斑病癥狀和病原菌 Pseudocercospora sp2. 2 藍莓葉點病癥狀 主要危害葉片 ， 新葉和老葉均危害 ， 病部多從葉中開始 ， 發(fā)病初期出現(xiàn)很多褪綠色大小不一小斑點 ， 后期呈棕色斑點 ， 斑點形狀不規(guī)則 ， 后期葉片逐漸變紅 ， 病斑仍清楚 。保濕培養(yǎng)后著生黑色小點 ， 即病菌分生孢子器 。78 月高溫干旱 ， 病害最重 ， 導致葉片提早枯落 ( 圖 2a) 。病原菌 擬盤多毛孢屬 Pestalotiopsis sp。分生孢子紡錘形 ，( 13 18) m ( 4 6) m， 直或稍彎 ， 3 個隔膜 ， 中間 3 個細胞黑褐色 ， 兩端細胞無色 ，圓錐形 ， 頂生 1 2 根附屬絲 ， 長 12 23 m， 基細胞具短柄 ( 圖 2b) 。分布及危害評價 擬盤多毛孢屬 Pestalotiopsissp 在世界各地廣泛發(fā)生 ， 可危害許多農作物及經濟植物 ， 例如玉米 、獼猴桃 、竹子等 。目前該病發(fā)病率為 5% 10%， 擬盤多毛孢菌是多數(shù)植物上的弱致病32中國森林病蟲 2018 年 3 月 第 37 卷 第 2 期真菌 ， 也是植物上常見腐生真菌 ， 通常引起不同程度斑點狀 ， 環(huán)境條件適合時發(fā)病較重 ， 擬盤多毛孢菌對生產危害不大 ， 及時噴施葉面肥或植物源真菌殺菌劑該癥狀很快緩解 。圖 2 藍莓葉點病癥狀和病原菌 Pestalotiopsis sp2. 3 藍莓炭疽病癥狀 藍莓炭疽病可危害藍莓花 、葉 、果 ， 嫩芽等 ， 主要危害葉片 ， 在高溫多雨時發(fā)病較重 ， 發(fā)病初期在葉緣或葉尖開始 ， 出現(xiàn)水漬狀棕褐色斑點 ， 后期變成深褐色或黑色 、近圓形 、中央稍凹陷的病斑 。天氣干燥 ， 病斑中央灰白色 ， 表皮下埋生小黑點即為病原菌分生孢子盤 。嚴重時造成葉片脫落 ， 嫩梢枯死 ，果實產量下降 ( 圖 3a) 。病原菌 刺盤孢屬 Colletotrichum sp。分生孢子盤多聚生 ， 黑褐色 ， 頂端不規(guī)則破裂 。分生孢子盤上著生剛毛直立 ， 黑褐色 ， 剛毛 1 3 根 ， 頂端較尖 ， 基部較粗 ， 1 3 個隔膜 ，( 80 320) m ( 2 4) m。分生孢子無色 ， 單胞 ， 紡錘形 、橢圓形或棒狀形 ， 兩端鈍圓 ， 含 1 個油球或無油球 ， 大小為 ( 15 27) m ( 3 5) m( 圖 3b) 。分布及危害評價 炭疽病原菌能侵染很多經濟植物 ， 在世界各地廣泛發(fā)生 ， 如美國 、英格蘭 、澳大利亞等均有報道 11 12。在中國遼寧 ， 曾報道藍莓炭疽病發(fā)生嚴重 ， 可造成相當大的經濟損失 ， 損失嚴重時甚至可以導致絕收 ; 有專家認為炭疽病的高發(fā)還會導致藍莓采收后微生物超標 ， 影響產品安全 10 13。刺盤孢屬 Colletotrichum sp 在貴州的藍莓 、獼猴桃 、竹子等經濟植物上有過報道 6 7， 13 14， 目前在貴州藍莓上發(fā)生危害較輕 ， 發(fā)病率為 5% 8%， 鑒于炭疽病在其它藍莓栽培區(qū)可造成相當大的經濟損失 ，因此不能輕視 ， 后期要定點定時觀察藍莓炭疽病的發(fā)生發(fā)展規(guī)律 。圖 3 藍莓炭疽病癥狀和病原菌 Colletotrichum sp2. 4 藍莓莖枯病癥狀 該病可危害藍莓葉 、莖 ， 發(fā)病初期在嫩莖上形成圓形或橢圓形病斑 ， 后期縱橫方向逐漸擴散到整個嫩枝 ， 嚴重時每株多個枝條受害 ， 嚴重影響開花和座果率 。嫩莖上密生許多黑色小點 ， 為病原菌的分生孢子器 ， 保濕后長白色絲狀霉層 ( 圖 4a) 。病原菌 蛇孢腔菌屬 Ophiobolus sp。子囊座散生 ， 球形或近球形 ， 淺棕色 ， 頂端呈乳頭狀突起 。子囊圓筒形或棍棒形 ， 大小為 ( 74 113) m ( 5 8) m。子囊孢子絲狀 ， 無色 ， 有 2 5 個隔膜 ， 大小為 ( 72 110) m ( 2 4) m( 圖 4b) 。分布及危害評價 目前蛇孢腔菌屬 Ophiobolussp 在土 耳 其 、美國等許多國家和地區(qū)廣泛發(fā)生 15 18， 我國主要在小麥栽培區(qū)發(fā)生較重 。蛇孢腔菌主要侵染禾本科植物 ， 例如小麥 、玉米 、竹子等植物 ， 可引起禾谷類根部毀滅性的影響 15。藍莓莖枯42 Forest Pest and Disease Mar 2018 No2病目前發(fā)病率為 10% 15%， 蛇孢腔菌在寄主藍莓上還未見報道 。鑒于蛇孢腔菌屬病原菌可能對藍莓造成毀滅性的影響 ， 所以必須密切注意藍莓莖枯病的侵染發(fā)生情況 ， 積極深入研究病害發(fā)生規(guī)律及防治措施 ， 及時進行有效防控 ， 避免和減少藍莓莖枯病的傳播 ， 影響貴州藍莓可持續(xù)發(fā)展 。圖 4 藍莓莖枯病癥狀和病原菌 Ophiobolus sp2. 5 藍莓灰霉病癥狀 藍莓灰霉病可危害藍莓的花和果實 。在花期 ， 陰雨天氣相對濕度大時最易感病 ; 初期多從花尖形成逐漸向花內擴展 ， 形成灰色病斑 ， 后期病斑上著生許多灰色霉層 ， 藍莓灰霉病病菌易迅速發(fā)生 、流行 。采收后的藍莓在室內存放一周后 ， 果實容易被感染 ， 上呈現(xiàn)灰色霉層 ， 很快軟化腐爛 ， 嚴重影響藍莓的果實品質 ( 圖 5a， b) 。病原菌 葡萄孢屬 Botrytis cinerea。分生孢子梗細長 ， 直立 ， 通常二叉或三叉分枝 。分生孢子圓形 、卵圓形 ， 單細胞 ， 無色 ， 單生或聚集呈葡萄狀 ， 大小為 ( 5 11) m ( 1 8) m( 圖 5c) 。圖 5 藍莓灰霉病癥狀和病原菌 Botrytis cinerea分布及危害評價 灰霉病在世界各地均有危害 ， 是植物上常見病害 。多數(shù)是腐生真菌 ， 少數(shù)是弱寄生真菌 ， 葡萄孢菌在藍莓上有報道 14。目前發(fā)病率 15% 25%， 該病原菌主要受天氣影響較大 ， 當52中國森林病蟲 2018 年 3 月 第 37 卷 第 2 期開花期連續(xù)數(shù)日陰雨天氣 ， 樹體抵抗力低 ， 座果率差時 ， 容易感染此病 ， 當天氣連續(xù)數(shù)日晴朗時病原菌數(shù)量自然降低 ， 病菌不再傳播蔓延 ， 不用噴施藥劑癥狀很快緩解 ， 對生產危害不大 。2. 6 藍莓枯萎病癥狀 藍莓枝條枯萎病往往發(fā)生在當年生嫩尖上 ， 主要癥狀是頂尖死亡 ， 緣葉脈向邊緣擴散到整葉 ， 發(fā)病初期呈水漬狀 ， 后期呈現(xiàn)黑色萎焉 ， 嚴重時 ，一個植株上多個枝條受害 。保濕培養(yǎng)后上著生黑色小點 ， 即分子孢子器 ( 圖 6a) 。病原菌 擬莖點霉屬 Phomopsis sp ， 分生孢子有 2 種 。1 種 型孢子 ， 鉤狀或絲狀 ， 單孢 ， 無色 ，( 9 26) m ( 1 2) m。另 1 種是 型孢子 ， 紡錘型或橢圓形 ， 無色 ， 單胞 ，( 4 7) m ( 1 2) m，內含 1 2 個油球 ， 其中 型孢子較多 ( 圖 6b) 。分布及危害評價 擬莖點霉菌呈世界性分布 ，是林業(yè)和農業(yè)上重要的病原菌和內生菌 。擬莖點霉屬真菌種類較多 ， 可引起多種病害 ， 例如果腐 、葉枯 、枝枯 、根腐等 ， 部分種類可以危害人或其他哺乳動物造成真足菌腫病 ， 在自然生態(tài)系統(tǒng)中占有非常重要的地位 。擬莖點霉菌在遼寧 、山東 、貴州麻江先后報道 ， 國內將擬莖點霉菌 Phomopsis vaccinii 危害果實的病害列為新的檢疫性病害 19 20。目前擬莖點霉在凱里市宣威鎮(zhèn)藍莓基地上發(fā)病率為 5% 8%， 危害藍莓報道 。鑒于擬莖點霉屬的病原菌可能危害藍莓果實 ， 其中部分病原菌已被列入檢疫病害 ， 雖然目前發(fā)病較輕 ， 對生產影響不大 ， 但是不能輕視該病的危害 ， 因此后期要定點定時觀察其病害的發(fā)生發(fā)展規(guī)律 ， 及時對這些病害進行有效防控 ， 避免此類病害的傳播 。圖 6 藍莓枯萎病癥狀和病原菌 Phomopsis sp2. 7 葉斑病癥狀 主要危害葉片 。葉片染病初期為黑褐色小斑點 ， 不久擴大為不規(guī)則形大斑 ， 褐色 。隨著斑點增多變大 ， 整葉變褐干枯向內卷曲 ， 高溫天氣病斑中間呈灰白色輪紋狀 。潮濕時 ， 病部出現(xiàn)黑色粉狀霉層 ( 圖 7a) 。高溫高濕有利于病害發(fā)生 。病原菌 鏈格孢屬 Alternaria sp。分生孢子梗單生或簇生 ， 直立或稍彎曲 ， 褐色具隔膜 。分生孢子單生 ， 倒棒形 ， 直或彎曲 ， 褐色 ， 具隔膜 ， 橫隔 2 4個 ， 縱 、斜隔 0 2 個 ， 分隔處略縊縮 ，( 13 20) m ( 5 11) m。喙短柱狀 ， 淡褐色 ( 圖 7b) 。分布及危害評價 藍莓葉斑病在世界各地廣泛發(fā)生 。鏈格孢屬病原菌能侵染很多經濟植物 ， 是植物上常見病害 ， 多數(shù)是腐生真菌 ， 少數(shù)是弱寄生真菌 。目前發(fā)病率為 10% 15%， 此病原菌與環(huán)境條件關系密切 。鏈格孢病原菌對生產危害不大 ， 及時溝施微生物菌肥或噴施葉面肥 ， 病害癥狀很快緩解 。圖 7 藍莓葉斑病癥狀和病原菌 Alternaria sp62 Forest Pest and Disease Mar 2018 No23 結 論與討論通 過近 2 a 對藍莓病害的研究 ， 我們已基本摸清了貴州藍莓葉 、莖 、花病害種類和主要病害危害情況 ， 初步鑒定出貴州藍莓葉 、莖 、花真菌病害 7 種 ，藍莓褐斑病 、藍莓炭疽病 、莖枯病 、枯萎病 4 種病害可能對藍莓產業(yè)造成潛在的危害 。此研究結果對今后藍莓主要病害的病原生物學特性 、發(fā)生規(guī)律 、病害檢疫及綜合防治具有一定的理論參考價值 ， 也為指導藍莓產業(yè)生產提供了重要的理論依據 。目前我國已報道的侵染藍莓葉部的真菌病害有5 種 2， 14， 20， 其 中假尾孢屬和蛇孢腔菌屬病原菌在藍莓上引發(fā)病害為首次報道 ， 同屬病原菌在不同寄主上危害癥狀不一 。假尾孢屬主要危害蔬菜 、花卉等植物 ， 蛇孢腔菌主要危害禾本科植物 ， 此次藍莓成為該病原菌的新寄主 ， 是否與貴州一帶采用稻谷殼作為藍莓栽培后覆蓋物 ， 果園附近有蔬菜和花卉基地有關 ， 有待進一步驗證 。本試驗僅從調查和鑒定病害入手 ， 其中重要病害發(fā)生發(fā)展規(guī)律 、發(fā)病特點等還需進行深入研究 。參 考文獻 : 1 任艷玲 ， 周杰 ， 王濤 ， 等 貴州藍莓產業(yè)的發(fā)展現(xiàn)狀及對策 J 貴州農業(yè)科學 ， 2016， 44( 6) : 172 175 2 張 國輝 ， 李性苑 ， 楊芩 ， 等 麻江縣藍莓重要病蟲害的種類調查和病原鑒定 J 浙江農業(yè)科學 ， 2016， 57( 3) : 372 375 3 方 中達 植病研究方法 M 3 版 北京 : 中國農業(yè)出版社 ，1998: 137 138 4 陸家云 植物病原真菌學 M 北京 : 中國農業(yè)出版社 ， 2001:449 533 5 魏景超 真菌鑒定手冊 M 上海 : 上?？茖W技術出版社 ，1979: 647 648 6 任春光 ， 桑維鈞 ， 李小霞 ， 等 赤水市撐綠竹真菌病害的種類調查與防治 J 中國森林病蟲 ， 2008， 27( 1) : 21 23 7 任 春光 ， 劉曼 ， 李安定 ， 等 貴州獼猴桃病害的種類調查及防治建議 J 中國森林病蟲 ， 2015， 34( 1) : 23 25 8 謝 學文 ， 趙倩 ， 郭英蘭 尾孢菌屬和假尾孢屬新記錄種 J 菌物學報 ， 2017， 36( 8) : 1164 1167 9 向 見 ， 譚志堅 菩提樹葉斑病病原菌鑒定及室內藥劑篩選試驗 J 現(xiàn)代農業(yè)科技 ， 2016( 23) : 115 119 10 劉 會梅 ， 王向軍 ， 張鳳娟 ， 等 兩種值得關注的藍莓病害 J 植物檢疫 ， 2016， 30( 4) : 42 47 11 POLASHOCK J J， EHLENFELDT M K， STETCH A W， et alAnthracnose fruit rot resistance in blueberry cultivars 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