蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)及其應(yīng)用分析.pdf

蔬 菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)及其應(yīng)用分析 張 俊 農(nóng)農(nóng) 技技 推推 廣廣 NN oo nn gg jj ii tt uu ii gg uu aa nn gg 一 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù) 在蔬菜種植的過(guò)程中 為達(dá)到優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的目標(biāo) 常常需要使 用到各種各樣的農(nóng)藥 如果農(nóng)藥的用量過(guò)大或是濃度超標(biāo) 那么 可能引起殘留 若是人們食用了農(nóng)藥殘留的蔬菜 則會(huì)對(duì)身體健 康造成嚴(yán)重危害 由此使得農(nóng)殘檢測(cè)成為一項(xiàng)非常重要的工作 而為了加快檢測(cè)速度 可以采用快速檢測(cè)技術(shù) 酶抑制快檢技術(shù) 是目前農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)中 技術(shù)最為成熟的一種方法 它的特 點(diǎn)主要表現(xiàn)在如下方面 檢測(cè)速度快 適用范圍廣 可以滿足不 同農(nóng)副產(chǎn)品的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)需要 該方法是利用酶的功能 基因受到某些物質(zhì)的影響 而導(dǎo)致酶的活力降低或是喪失的現(xiàn) 象 來(lái)完成檢測(cè) 酶抑制劑是該檢測(cè)方法的核心 具體的檢測(cè)原 理如下 借助有機(jī)磷與氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)乙酰膽堿酶的抑制 作用 在共存體系當(dāng)中加入農(nóng)產(chǎn)品的樣品提取液 若是樣品中含 有機(jī)磷與氨基甲酸酯類農(nóng)藥 則酶的活性會(huì)受到明顯的抑制 二 快速檢測(cè)技術(shù)在蔬菜農(nóng)藥殘留中的具體應(yīng)用 目前 在蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)中 應(yīng)用較為廣泛的快速檢測(cè)技 術(shù)有兩種 一種是酶抑制劑 另一種是速測(cè)儀 下面分別對(duì)這兩 種檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用過(guò)程以及實(shí)施要點(diǎn)進(jìn)行分析 1 酶抑制劑的應(yīng)用 1 保存 酶抑制速測(cè)試劑在正式配制前 可以采用冷凍的 方式進(jìn)行保護(hù) 有效期為 18個(gè)月 如果是在 1 5 的條件下冷 藏保存 有效期為 12 個(gè)月 常溫保存的有效期為 2 個(gè)月 2 配制 速測(cè)試劑的具體配制方法如下 取一包緩沖劑 然 后用 500ml 的蒸餾水進(jìn)行攪拌 使緩沖劑充分溶解后 置于 常溫 的條件下 備 用 取一 瓶底 物加入 10ml 蒸餾水后 搖勻 溶解 并 在 1 5 的條件下冷藏保存 取一 瓶 酶液 加入 10ml 緩沖液 搖勻 溶解 之 后 放 入到 1 5 的條件下冷藏保存 取一 瓶 顯 色 劑 加 入 10ml 緩沖液 搖勻 溶解后 放 入到 1 5 的條件下冷藏保存 3 樣液制 備 選 取具有 代 表性的蔬菜樣品 將泥土去除干凈 帶葉 的蔬菜應(yīng)當(dāng)取 葉片 制作成 1cm 見(jiàn) 方的 碎塊 準(zhǔn)確稱 取 2g 放 入到樣品 瓶 當(dāng)中 然后加入 10ml 緩沖液 振蕩 2min 倒出 提取液 澄清 3 5min 左右 作為 待 測(cè)液樣 需要 注意 的是 如果制 備 的液 樣較為 混濁 或是 葉綠素 較 多 則可使用 濾紙 進(jìn)行過(guò) 濾處 理 4 檢測(cè) 步驟 及要點(diǎn) 速測(cè)儀 器通電開(kāi) 機(jī) 之 后 進(jìn)入到 待 測(cè) 界 面 預(yù)熱 取試 管 或是 西林瓶 空白 對(duì) 照 加入 2 5ml 緩沖液 樣 品 加入 2 5ml 待 測(cè)樣液 隨 后分別 向空白 與樣品當(dāng)中加入 100 l 酶 和 100 l 顯 色 劑 振蕩數(shù)次之 后 置于 37 恒 溫 箱內(nèi)培 養(yǎng) 10min 當(dāng)不具 備 加溫 培養(yǎng) 的條件 時(shí) 可在 20 以 上 的 環(huán)境 中 放置 15min 分別加入 100 l 底 物 振蕩數(shù)次之 后 立即倒 入 比色 皿 當(dāng)中 放 入儀 器 檢測(cè) 通道 對(duì) 照 應(yīng)當(dāng) 放 入 第 一 通道 按 下檢測(cè) 按鍵 速測(cè)儀 器便 會(huì) 自 行完成檢測(cè) 并打印出 檢測(cè) 報(bào)告 5 結(jié) 果 判定 蔬菜農(nóng)藥殘留的檢測(cè) 結(jié) 果以酶 被 有機(jī)磷或是 氨基甲酸酯類農(nóng)藥抑制 為 陽(yáng) 性 未 抑制 為 陰 性 表 示 將 測(cè)試 結(jié) 果與 空白 進(jìn)行 比 較 未發(fā)生變色 的 情況 或 呈 現(xiàn) 出淺藍(lán)色 則 為 陽(yáng) 性 結(jié) 果 變 為 天藍(lán)色 或與對(duì) 照卡 的 顏色相 同 則為 陰 性 結(jié) 果 檢測(cè) 結(jié) 果 呈陽(yáng) 性的蔬菜樣品 需要 通 過(guò) 其 它分析方法 對(duì)農(nóng) 藥的品種及含量進(jìn)行測(cè) 定 抑制 率 50 為 合格 50 為農(nóng)殘 超標(biāo) 若是檢測(cè) 結(jié) 果在 45 55 這一 區(qū)間 范圍 內(nèi)時(shí) 應(yīng)當(dāng)進(jìn)行 雙 樣 復(fù) 測(cè) 以此來(lái) 確 保檢測(cè) 結(jié) 果的 準(zhǔn)確 性 6 注意事 項(xiàng) 蔬菜農(nóng)殘快速檢測(cè)中使用的試劑應(yīng)當(dāng) 避免出 現(xiàn) 交叉污染 的 情況 試劑 倒出之 后 不得重 新倒回 試劑 瓶?jī)?nèi) 對(duì) 試劑進(jìn)行使用前 應(yīng)當(dāng)充分 搖勻 從冰箱內(nèi) 取 出 的液體試劑應(yīng)當(dāng) 置于室 溫條件下 10min 以 上 方可使用 為 防止空氣 中殘留的藥 物分 子 對(duì)試劑造成影響 檢測(cè) 室 的 周 圍不可以使用如下藥物 滅 蚊 劑 農(nóng)藥 等 由 于部 分蔬菜當(dāng)中含對(duì)酶影響的植物 次生 物質(zhì) 如 蔥 蒜 韭 菜 蘿卜 香 菜 芹 菜 等 可能會(huì)使檢測(cè) 結(jié) 果 呈 現(xiàn) 出假 陽(yáng) 性的 情況 對(duì) 于 此類蔬菜 在樣品 處 理 時(shí) 可以采用 整株浸 提 的方法進(jìn)行取樣 如果溫度在 37 以下 酶 反 應(yīng)的速度會(huì)降低 因此 必須 保 證 溫度在 37 若是 空白 對(duì) 照沒(méi) 有 變色 可能是緩 沖液加的不 夠 也 可能是溫度過(guò)低 可 根據(jù) 實(shí) 際情況 進(jìn)行 調(diào)整 2 速測(cè)儀的應(yīng)用 在蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)中 可以使用 ZYD NP 18A 型 速測(cè)儀 該儀 器 的檢測(cè)原理如下 有機(jī)磷與氨基甲酸酯類農(nóng)藥在一 定 的條 件下 對(duì)膽堿酯酶的功能會(huì)產(chǎn) 生 抑制作用 抑制 率 主要與農(nóng)藥的濃 度有 關(guān) 即 濃度 越 高抑制 率越 高 通 過(guò)速測(cè)儀在農(nóng)殘檢測(cè)中的 合 理 運(yùn) 用 除 了能 夠 大 幅 度提 升 檢測(cè)速度 之外 還 能保 證 檢測(cè) 結(jié) 果的 準(zhǔn) 確 性 具體的應(yīng)用要點(diǎn)如下 將 速測(cè)儀的 電源接通 并將 儀 器 的 左 側(cè)開(kāi)關(guān)調(diào)節(jié) 到 開(kāi) 的 位置上 然后 打開(kāi)上蓋 按 START 鍵進(jìn)行 預(yù) 熱 當(dāng)達(dá)到 反 應(yīng)溫度 之 后 屏幕上 會(huì) 出 現(xiàn) TEMP1 的 字 樣 表 示預(yù) 熱 完 畢 等待倒計(jì)時(shí)即 可 將 試 紙外部 的保護(hù) 膜去掉 插 入試 紙 然 后在 白片上滴 加提取液 以 1 2滴左右 為 宜 重 新按 下 START 鍵 當(dāng) 屏幕 顯 示 CLOS 時(shí) 要 將 前 蓋合上 聽(tīng) 到 嘩 嘩 嘩 的 聲音之 后 操 作 結(jié)束 打開(kāi)上蓋 對(duì)試 紙 的 顏色 進(jìn)行 觀察 如果是 藍(lán)色 代 表 陰 性 結(jié) 果 若是 淺藍(lán)色代 表 弱陽(yáng) 性 白色代 表 陽(yáng) 性 綜上 蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)是一項(xiàng)較為 復(fù)雜且 系 統(tǒng) 的工作 為 在保 證 檢測(cè) 結(jié) 果 準(zhǔn)確 性的基 礎(chǔ)上 提高檢測(cè)速度 應(yīng)當(dāng)對(duì)快速檢 測(cè)技術(shù)進(jìn)行 合 理 運(yùn) 用 尤其 是酶抑制劑 和 速測(cè)儀 這兩種方法的 檢測(cè)效果 都比 較 好 具有一 定 的 推 廣使用 價(jià)值 在 未 來(lái)一 段時(shí) 期 應(yīng)當(dāng)加大對(duì)快速檢測(cè)技術(shù)的 研究 力度 從 而使 其更好地 為蔬 菜農(nóng)殘測(cè) 定服務(wù) 作者單位 236827安徽省亳州市譙城區(qū)五馬鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合 服務(wù)站 58