新疆加工番茄細菌性斑點病與潰瘍病復合侵染鑒定及防治建議_康華軍_溫智浩_袁軍海_.pdf

新疆地處北緯 3747°之間，常年干燥少雨，日照時間長，晝夜溫差大，是我國面積最大的加工番茄種植基地，與美國加州、地中海并列為世界三大番茄醬產(chǎn)區(qū)。據(jù)新疆統(tǒng)計年鑒記載，2015年新疆加工番茄種植面積6.9萬hm2（103.5 萬畝），總產(chǎn)量761.3萬t。近年來，由于加工番茄種植面積的不斷擴大以及頻繁的從國內(nèi)外引種，病害發(fā)生逐年加重，導致加工番茄的品質(zhì)和產(chǎn)量降低，造成了很大的經(jīng)濟損失。20132017年，筆者連續(xù)5a （年）對新疆昌吉回族自治州阜康市、呼圖壁縣、瑪納斯縣、奇臺縣、吉木薩爾縣，巴音郭楞蒙古自治州輪臺縣、焉耆回族自治縣、和靜縣、和碩縣、博湖縣，石河子市等加工番茄主產(chǎn)區(qū)的病害發(fā)生情況進行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)加工番茄細菌性斑點病和潰瘍病嚴重發(fā)生，是造成番茄產(chǎn)量降低的主要原因之一，而且兩種病害復合發(fā)生現(xiàn)象嚴重。由于兩種細菌性病害均可在番茄葉片、莖稈、果實上顯癥，導致生產(chǎn)上難以區(qū)分，給防治帶來一定的困難。1 新疆加工番茄細菌性病害發(fā)生情況20132017年筆者對新疆加工番茄主產(chǎn)區(qū)病害發(fā)生情況進行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)南疆和北疆氣候差異大，病害種類有所不同。在北疆的石河子市、昌吉回族自治州阜康市、呼圖壁縣、瑪納斯縣、奇臺縣、吉木薩爾縣等地區(qū)，由于加工番茄種植面積不斷擴大、主栽品種單一以及連作種植等原因，加工番茄細菌性斑點?。?Pseudomonas syringaepv. tomato）和潰瘍?。?Clavibacter michiganensissubsp.michiganensis）發(fā)生異常嚴重，病株率一般為 30%40%，嚴重時病株率高達 60%，且同一地塊兩種病害復合發(fā)生現(xiàn)象普遍。與北疆相比，南疆巴音郭楞蒙古自治州輪臺縣、焉耆回族自治縣、和靜縣、和碩縣、博湖縣等地區(qū)，早疫?。?Alternaria solani）危害嚴重，細菌性斑點病和潰瘍病發(fā)生相對較輕。2 加工番茄細菌性斑點病和潰瘍病田間癥狀2.1 加工番茄細菌性斑點病 病原菌為丁香假單胞菌番茄致病變種（ Pseudomonas syringaepv.tomato，Pst）。番茄幼苗期與成株期均可染病。幼苗期發(fā)病主要侵染葉片，成株期可侵染葉片、葉柄、莖稈、花和果實。發(fā)病初期，葉片中部或葉緣產(chǎn)生近圓形或不規(guī)則形褐色、油漬狀小斑點，病斑直徑13 mm，周圍有或無黃色暈圈（彩色圖版 1、2）；發(fā)病后期，葉片上的病斑變?yōu)楹谏蚝诤稚?，干枯易折碎且易連成片；葉柄和莖稈感病，初期產(chǎn)生圓康華軍，男，碩士研究生，專業(yè)方向：蔬菜病害診斷研究，E-mail：1101415066qq.com* 通訊作者：柴阿麗，女，副研究員，專業(yè)方向：蔬菜病害診斷研究，E-mail：chaialicaas.cn；李寶聚，男，研究員，專業(yè)方向：蔬菜病害綜合防治研究，E-mail：libaojucaas.cn收稿日期：2018-02-05；接受日期：2018-04-20基金項目 ：公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項（201303115），國家大宗蔬菜產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項目（CARS-25）新疆加工番茄細菌性斑點病與潰瘍病復合侵染鑒定及防治建議康華軍1，2溫智浩3袁軍海1柴阿麗2*許建軍4何 偉4李寶聚2*（1河北北方學院，河北張家口 075061；2中國農(nóng)業(yè)科學院蔬菜花卉研究所，北京 100081；3山西農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院，山西太谷030801；4新疆農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所，新疆烏魯木齊830091）近幾年新疆加工番茄細菌性斑點病和潰瘍病發(fā)生嚴重，且兩種病害復合發(fā)生，均可在番茄葉片、莖稈、果實上顯癥，在進行防治時應(yīng)綜合分析病害發(fā)生的原因，做到預防為主，發(fā)病嚴重時結(jié)合多種方法進行綜合防治。83新優(yōu)品種栽培管理本期視點產(chǎn)業(yè)市場病蟲防控 栽培管理中 國 蔬 菜 CHINA VEGETABLES2018（6）：83-86形或近圓形褐色小斑點，病斑周圍無黃色暈圈，隨著病情發(fā)展，病斑變?yōu)楹谏蚝诤稚⒖v向和橫向擴展，嚴重時可環(huán)繞莖稈或葉柄（彩色圖版 3）；病原菌侵染花時，花蕾上產(chǎn)生油墨狀褐色病斑，發(fā)病嚴重時病斑易連成片（彩色圖版4），萼片表面產(chǎn)生邊緣褐色中央灰白色病斑，周圍無黃色暈圈（彩色圖版5）；果實感病，初期產(chǎn)生圓形或近圓形褐色油漬狀小斑點，直徑約3 mm，后期病斑逐漸變?yōu)楹谏蚝诤稚?，易連成片，中央形成木栓化瘡痂（彩色圖版 6）。2.2 加工番茄細菌性潰瘍病 病原菌為密執(zhí)安棒形桿菌密執(zhí)安亞種（ Clavibacter michiganensissubsp.michiganensis，Cmm）。加工番茄細菌性潰瘍病菌主要侵染葉片、莖稈和果實。幼苗期和成株期均可發(fā)病，幼苗期染病，可造成番茄植株死亡，減產(chǎn)嚴重。成株期發(fā)病，一般是下部葉片先表現(xiàn)癥狀，葉緣變?yōu)楹稚⑾蛏暇砬ú噬珗D版7），似火燒 狀，病健交界處變黃褪綠；莖部感病，病原菌從莖部傷口侵入，然后沿維管束向上向下擴展，致使髓部中空，維管束變褐腐爛，莖表皮變褐并生出許多不定根（彩色圖版8）；果實感病，表面產(chǎn)生邊緣乳白色中央粉色的圓形病斑，似鳥眼狀，隨病情加重，病斑中央木栓化突起且易連成片，表皮粗糙（彩色圖版 9）。2.3 加工番茄細菌性斑點病和潰瘍病復合侵染癥狀 細菌性斑點病和潰瘍病復合侵染后，主要是葉片和果實表現(xiàn)癥狀。葉片感病初期，葉脈和葉肉均可產(chǎn)生近圓形或不規(guī)則形褐色小斑點，周圍有或無黃色暈圈，隨發(fā)病程度加重，病斑變?yōu)楹谏蚝诤稚走B成片，葉緣變?yōu)楹诤稚珘乃罓?，病健交界處褪綠變黃（彩色圖版 10、11）；果實感病，產(chǎn)生兩種病斑：一種是邊緣乳白色中央褐色的圓形病斑，病斑中央木栓化，似鳥眼狀；另一種是邊緣褐色中央灰白色的不規(guī)則形、油漬狀病斑，稍大的病斑邊緣變?yōu)楹谏蚝诤稚?，中央木栓化；隨著病情加重，兩種病斑都易連成片，造成果實表面粗糙不平（彩色圖版 12）。復合侵染與單一侵染田間癥狀主要區(qū)別在番茄葉片和果實上：當發(fā)生單一侵染時，番茄細菌性斑點病是在葉片中間產(chǎn)生褐色、圓形或近圓形斑點，周圍有或無黃色暈圈；番茄潰瘍病是在葉緣產(chǎn)生黃褐色的干邊，似火燒狀；當發(fā)生復合侵染時，番茄葉片邊緣為褐色、枯死狀，葉片中間形成潰瘍狀穿孔。果實上發(fā)生單一侵染時，番茄細菌性斑點病是在果實表面產(chǎn)生褐色或黑褐色的病斑，潰瘍病形成的是邊緣乳白色中央粉紅色的病斑；當兩種病害復合侵染時，會在果實表面同時產(chǎn)生細菌性斑點?。ê稚蚝诤稚┡c潰瘍?。B眼狀）的 病斑。3 加工番茄細菌性斑點病和潰瘍病病菌復合侵染鑒定20132017年，筆者從新疆昌吉、瑪納斯等加工番茄生產(chǎn)基地采集了 35 份疑似番茄細菌性斑點病菌與潰瘍病菌復合侵染的病害樣本，分別進行了葉片組織病原菌分子檢測、分離培養(yǎng)以及致病性測定。分子檢測：取番茄疑似發(fā)病樣本的葉片和莖稈組織，采用植物基因組DNA提取試劑盒，提取發(fā)病組織基因組DNA。然后分別使用根據(jù)Cmm 的 pat-1 基因設(shè)計的特異性引物CMM5/CMM6（CMM5：5- GCGAATAAGCCCATATCAA- 3 ，CMM6：5-CGTCAGGAGGTTCGCTAATA-3）（Dreier etal.，1995） 與 根 據(jù) hrpZPst基因設(shè)計 的 Pst 特 異 性 引 物 MM5F/MM5R（MM5F：5-GAACGAGCTGAAGGAAGACA-3，MM5R：5-CAGCCTGGTTAGTCTGGTTA-3）（Zaccardelli etal.，2005）對基因組 DNA 進行 PCR 擴增和測序。瓊脂糖凝膠電泳檢測結(jié)果顯示，35 份疑似病害樣本均分別擴增出預期大小為614 bp與532 bp的特異性片段。從NCBI網(wǎng)站對測序結(jié)果進行BLAST比對，結(jié)果顯示，與 Pst（Genbank 登錄號：EU296548.1）和 Cmm（Genbank 登錄號：MF409285.1）序列同源性達到 99%100%。細菌分離培養(yǎng)：對采集的 35 個番茄發(fā)病組織進行細菌劃線分離，共分離出 Pst 菌株 38 株，Cmm菌株 40 株，并對分離出的所有 Pst 和 Cmm 菌株分別進行致病性測定。采用噴霧法接種 Pst 后，葉片發(fā)病初期產(chǎn)生近圓形褐色小斑點，周圍有或無黃色暈圈，產(chǎn)生番茄細菌性斑點病的典型癥狀；采用剪葉法（將手術(shù)剪前端1 cm蘸取菌懸液后，在幼苗頂端新葉處將主莖剪斷）接種 Cmm 后，植株出現(xiàn)葉片萎蔫，莖部壞死癥狀。從接種發(fā)病植株上再次84新優(yōu)品種栽培管理本期視點產(chǎn)業(yè)市場病蟲防控 栽培管理中 國 蔬 菜 CHINA VEGETABLES進行細菌分離，經(jīng)分子檢測為 Pst 與 Cmm。結(jié)果表明，從新疆采集的疑似病害樣本由番茄細菌性斑點病菌和潰瘍病菌復合侵染引起。分子檢測與細菌的分離培養(yǎng)以及致病性測定等結(jié)果表明，從新疆采集的加工番茄樣本確實發(fā)生了番茄細菌性斑點病菌與潰瘍病菌的復合侵染。4 加工番茄細菌性斑點病與潰瘍病發(fā)生規(guī)律4.1 發(fā)病條件4.1.1 種子帶菌 細菌性斑點病菌與潰瘍病菌既可以附著在種子表面，同時也可以侵入到果實內(nèi)部而導致種子內(nèi)部帶菌（李煥玲等，2011；宋加偉等，2016）。潰瘍病菌種子帶菌率為1%5%，從病果上收集的種子播種到大田中可造成高達 53.4% 的幼苗發(fā)?。▌A和張樂，1989）。少量帶有細菌性斑點病菌的種子播種到土壤中，在苗期即可表現(xiàn)癥狀，條件適宜時全田大面積發(fā)生。種子帶菌可能是新疆加工番茄細菌性斑點病和潰瘍病大發(fā)生的原因之一。4.1.2 土壤及病殘體帶菌 細菌性斑點病菌可在土壤中存活 210 d（天）以上（Blancard，2012），潰瘍病菌可在病殘體及土壤中存活至少 2 a（年）（Gleason etal.，1991）。當土壤濕度大、溫度較高 時，病原菌易大量繁殖，播種后會粘附在種子表面，成為當年的初侵染源。另外，病原菌也可在田塊周圍的雜草上越冬，成為翌年的初侵染源。4.1.3 氣候條件 細菌性斑點病與潰瘍病均屬于溫暖高濕型病害，溫度 25 左右、濕度 90% 以上時容易導致這兩種病害的流行（李煥玲等，2011；王瑩瑩等，2015）。新疆的氣候?qū)儆跍貛Т箨懶詺夂?，每年?8月是新疆氣溫最高、降雨量最多的時期，氣候條件適宜，非常有利于細菌性斑點病與潰瘍病的流行。4.1.4 田間管理 種植密度過大、地勢低洼、大水漫灌、排水不良等都容易導致田間濕度過大而引起病害流行；偏施氮肥、不及時拔除發(fā)病植株、隨意堆放病殘體等都給病原菌的侵入提供了機會。4.2 傳播方式4.2.1 帶菌種子、種苗調(diào)運 帶菌種子與種苗遠距離調(diào)運是病原菌遠距離傳播的重要原因。檢驗檢疫部門對種子檢驗不及時、檢驗檢疫方法不規(guī)范都會導致細菌性斑點病菌與潰瘍病菌傳播到新的無病田塊。帶有細菌性斑點病菌的種子播種到土壤中，番茄幼苗期即可發(fā)病而造成較大的經(jīng)濟 損失。4.2.2 風雨傳播 種植密度過大，并伴有大風天氣會導致番茄枝葉不停的摩擦而造成傷口，細菌可由傷口侵入；若同時遇上降雨天氣，田間濕度過大，發(fā)病部位會溢出菌膿，菌膿會隨著雨水飛濺而近距離傳播。4.2.3 農(nóng)事操作 噴灌、大水漫灌可將空氣及土壤中的病原菌傳播到健康的番茄植株上，條件適宜即可造成病害流行；農(nóng)事人員頻頻接觸發(fā)病植株、拔除發(fā)病植株后不經(jīng)消毒再直接接觸健康植株均可造成病原菌的近距離傳播。4.2.4 昆蟲 昆蟲取食染病果實或葉片后，病原菌會粘附在口器上，昆蟲再次取食健康植株時即可傳播病原菌（Bashan，1986）。5 防治建議番茄細菌性斑點病與潰瘍病均為細菌性病害，病原菌主要經(jīng)番茄植株的傷口或氣孔侵入，通過雨水、種子、農(nóng)事操作等傳播。因此，在進行防治時應(yīng)綜合分析病害發(fā)生的原因，做到預防為主，發(fā)病嚴重時應(yīng)結(jié)合多種方法進行防治。5.1 加強檢疫 番茄細菌性斑點病菌與潰瘍病菌皆為我國檢疫性細菌，且都可以通過種子進行遠距離傳播，因此需要制定嚴格的檢疫措施，對進入菜區(qū)的所有種子進行多種方法檢測，防止帶菌種子進入非疫區(qū)。5.2 選育抗病品種 選用抗病品種是防控植物病害最經(jīng)濟、有效、省時省力的措施。在細菌性斑點病與潰瘍病嚴重發(fā)生的地區(qū)應(yīng)大力推廣抗病品種。目前國外學者已經(jīng)篩選出了部分抗細菌性斑點病的品 種， 如 Ontario 7710、PI 126430 等（Pilowsky &Zutra，1986），此外還有細葉番茄 1126430、多毛番茄等抗病品種。對于細菌性潰瘍病，目前國內(nèi)外還沒有發(fā)現(xiàn)具有商業(yè)價值的抗病品種，僅發(fā)現(xiàn)部分中度抗性材料，如 Lycopersicon pimpnellifolium（L.）Mill.、 L. peruvianum（L.）Mill. 以 及 L. hirsutumHum&Bonpl（Gleasonetal.，1993）。5.3 種子處理 用 55 溫湯浸種 25 min（分），或用 1.05% 次氯酸鈉溶液浸種 2030 min（分）（Blancard，2012），清水沖洗后晾干催芽，可有效85新優(yōu)品種栽培管理本期視點產(chǎn)業(yè)市場病蟲防控 栽培管理中 國 蔬 菜 CHINA VEGETABLES減少種子上的細菌性斑點病菌數(shù)量（Louws etal.，2001）。用5%的鹽酸溶液浸泡種子510h （小時）可有效殺死種子表面和內(nèi)部的潰瘍病菌（李明遠和柯常取，1991）。另外，可以將成熟的疑似帶有潰瘍病的果實打碎后放在 1 個容器內(nèi)，不要加水，使種子完全淹沒于發(fā)酵液中并密封容器，使其在21 條件下發(fā)酵 4 d（天），發(fā)酵完畢后立即取出種子洗凈，晾干備用，該方法可殺死種子表面全部以及種子內(nèi)部大部分的潰瘍病菌（馮蘭香，1992）。需要注意的是，發(fā)酵時間不宜過長，否則易降低種子的萌發(fā)率（Leónetal.，2011）。5.4 苗床處理 細菌性斑點病菌與潰瘍病菌可在土壤和病殘體中存活很長時間，一旦條件適宜就會侵染番茄。因此最好選擇新苗床或者選用消毒的育苗基質(zhì)進行育苗。若使用舊苗床，需每平方米苗床噴灑 30 mL 濃度為 40% 的甲醛溶液，覆膜 45 d（天）后揭膜，晾 15d（天）后再播種。5.5 農(nóng)業(yè)防治 加強田間管理：不宜過度密植；生長前期穩(wěn)施氮肥，避免營養(yǎng)生長過旺不利于通風排濕。發(fā)病初期及時摘除病葉并帶出田園燒毀或深埋；避免過多人員進出田園損傷枝葉，為病原菌的侵入提供機會；盡量采用滴灌技術(shù)，避免大水漫灌，以防田間濕度過大。合理輪作：發(fā)病較重的田塊與非茄科作物實行 2 a（年）以上的輪作（Cuppels &Elmhirst，1999），可有效減少病原基數(shù)。5.6 藥劑防治 番茄潰瘍病屬于系統(tǒng)性侵染病害，一旦植株出現(xiàn)明顯的癥狀后再施藥，效果會很不理想。因此，從選種、播種以及育苗時就應(yīng)開始做好預防工作，及時對種子和苗床進行滅菌消毒處理。苗期發(fā)現(xiàn)病株時應(yīng)立即拔除，燒毀或深埋。番茄成株期，發(fā)病初期可選擇37.5%氫氧化銅懸浮劑 800 倍液，或 3% 中生菌素可濕性粉劑 600 倍液，或 2% 春雷霉素水劑 300 倍液，或 20% 噻菌銅懸浮劑 700 倍液噴霧防治。細菌性斑點病發(fā)病初期可用2%春雷霉素水劑800倍液，或3%中生菌素可濕性粉劑800倍液，或77%氫氧化銅可濕性粉劑800倍液，或72%農(nóng)用硫酸鏈霉素可濕性粉劑30004 000 倍液噴霧防治。以上藥劑每隔 710 d（天）噴施 1 次，直至控制病情。注意輪換使用不同種類的藥劑，以減緩抗藥性的產(chǎn)生。參考文獻馮蘭香1992把好無病種子關(guān)，杜絕番茄潰瘍病中國蔬菜， （4）：45-46李煥玲，石延霞，謝學文，李寶聚2011番茄潰瘍病的發(fā)生規(guī)律與防治技術(shù)中國蔬菜，（23）：24-27李明遠，柯常取1991番茄潰瘍病的發(fā)生與防治蔬菜，（1）：31-32劉泮華，張樂1989番茄潰瘍病鑒定研究植物檢疫，3（1）：31-33宋加偉，石延霞，謝學文，柴阿麗，李寶聚2016番茄細菌性斑點病莖部危害嚴重中國蔬菜，（9）：84-85王瑩瑩，柴阿麗，李寶聚2015番茄細菌性斑點病癥狀多樣性與綜合防治中國蔬菜，（11）：82-84BashanY1986Field dispersalofPseudomonas syringaepvtomato， Xanthomonas campestrispv.vesicatoria，and 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