不同基因型百合花絲組織培養(yǎng)研究.pdf

北京農學院學報 nullnullnullnullnull nullnull null nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull 收稿日期 nullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnull 基金項目 北京農學院大學生科研訓練項目資助 nullnullnullnullnull nullnullnull nullnull 第一作者 哈麗則熱姆 賽達合買提 本科生 null nullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnull 通信作者 王文和 教授 主要從事植物生殖生物學和植物資源學研究 nullnullnull nullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull 不同基因型百合花絲組織培養(yǎng)研究 哈麗則熱姆 賽達合買提 王 null 聰 呂彥杰 趙祥云 何祥鳳 王文和 null 北京農學院園林學院 北京 nullnullnullnullnullnull 摘 null 要 目的 以不同基因型百合花絲為外植體進行組織培養(yǎng) 研究培養(yǎng)基的適用性及花絲不同部位組織培養(yǎng) 的難易程度 方法 利用組織培養(yǎng)技術對花絲進行誘導擴繁 結果 試驗所用培養(yǎng)基適合不同基因型百合 白特里 昂菲特 和 文雅王子 和 白天堂 及亞洲百合新品系的優(yōu)良單株 nullnull 花絲均能誘導分化出不定 芽 對于大花卷丹花絲可誘導得到愈傷組織 屬于不同基因型的材料其花絲組培難易程度存在差異 誘導分化 率從高到低依次為 白特里 昂菲特 和 文雅王子 和 白天堂 和亞洲百合新品系nullnull及大花卷丹 以花絲 不同部位為外植體 誘導分化率存在差異 花絲基部 null 花絲中部 null 花絲頂部 結論 培養(yǎng)基 nullnullnullnullnull nullnullnullnull nullnull nullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnull糖nullnullnull nullnull瓊脂nullnull null 適用于以不同基因型百合的花絲為外植體誘導愈傷或進一步 形成不定芽 而且尤以花絲基部誘導分化率最高 該研究結果為在不損傷珍貴的優(yōu)良單株和野生百合資源的前 提下 通過花絲誘導進行組培擴繁 為進一步選育新品種和保存資源探索新途徑 關鍵詞 百合 基因型 花絲 組織培養(yǎng) 中圖分類號 nullnull nullnullnullnull 文章編號 nullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull文獻標志碼 nullnull nullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull 百合 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 為百合科百合屬多年生球 根花卉 因花朵碩大 花色艷麗 成為世界上重要的 nullnullnull 北 null 京 null 農 null 學 null 院 null 學 null 報 第 nullnull 卷 切花之一 在園林綠化 食用 藥用等方面 同樣具 有很高的觀賞價值 食用價值和經濟價值 null nullnull 由于 百合以營養(yǎng)繁殖為主 極易遭受病毒侵染并積累病 毒 出現(xiàn)種質退化現(xiàn)象 嚴重影響百合的產量和品 質 并且百合的傳統(tǒng)繁殖方式繁殖效率低 所需周 期長嚴重限制相關產業(yè)的經濟效益 目前 百合組織培養(yǎng)技術主要以鱗莖鱗片為外 植體 但是存在污染率較高 易攜帶病毒等問題 null 百合組織培養(yǎng)過程中 最大的障礙之一就是污染 null 利用花絲誘導組織培養(yǎng)可以有效解決這個問題 null 因為花蕾表面容易消毒 里面的花絲干凈 污染率 低 一朵花 null 個花絲 每個花絲至少可切成 null 段 一 株百合 nullnullnull 個花蕾 外植體的數(shù)量較大 花絲誘導 出的無菌苗可脫除某些病毒 帶毒率降低 null 切取花 蕾不影響百合生長 對少量寶貴資源的保存及優(yōu)良 雜交單株的擴繁是極好的辦法 利用花絲誘導組 織培養(yǎng)具有很重要的現(xiàn)實意義 該試驗以 白特里 昂菲特 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull 文 雅 王 子 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 白天堂 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 亞 洲百合新品系 nullnull 和大花卷丹 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 花絲為外植體 利用北京農學 院百合研究課題組多年研究百合組織培養(yǎng)得到的 培養(yǎng)基配方對這 null 種材料進行誘導 驗證該培養(yǎng)基 的適用性 探索不同基因型百合不定芽誘導率 以 期在不損傷珍貴的優(yōu)良單株和野生百合資源的前 提下 通過花絲誘導進行組培擴繁 為進一步選育 新品種和保存資源探索新途徑 nullnull 材料與方法 nullnullnull 試驗材料 試驗材料為 白特里 昂菲特 和 文雅王子 和 白天堂 和亞洲百合新品系 nullnull 及大花卷丹 詳 細信息見表 null null 種材料均種植于北京農學院園林 植物資源圃 選用長勢良好 取開放前 nullnull 的花蕾若 干 作為外植體進行誘導分化研究觀察 表null null 百合材料 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 百合材料nullnullnull null 所屬品系nullnullnullnull 來源nullnullnull nullnullnull 國家nullnullnullnullnullnull null 白特里 昂菲特 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull 引進 荷蘭 文雅王子 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull 北京農學院百合研究課題組自育 中國 白天堂 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null 引進 荷蘭 亞洲百合新品系nullnull null 北京農學院百合研究課題組自育 中國 大花卷丹nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull 遼寧清源 中國 nullnullnull 試驗方法 nullnullnullnull 試驗設計 null 使用單因素隨機區(qū)組設計 將 每個花蕾的花絲分為花絲頂部 花絲中部 花絲基 部三段 每部分取 nullnullnullnullnull 作為外植體接種 每瓶 接種 null 段花絲 每種百合材料接種 nullnull 瓶 nullnullnullnull 材料處理 null 摘取不同的 null 種百合未開放花 蕾 用流水沖洗 nullnullnullnull 用吸水紙吸干水分 將處理 好的花蕾放在超凈工作臺進行操作 nullnullnull 乙醇消毒 nullnullnull 用無菌鑷子夾取花蕾在酒精燈外焰快速過火 nullnullnullnullnull 花蕾表面乙醇燃燒完即可 nullnullnullnull 花絲誘導 null 在超凈工作臺中用無菌的鑷子 和手術刀撥開外表花瓣 取出里面的雄蕊 摘除花 藥部分 剩余的花絲部分平均分成花絲頂部 花絲 中部 花絲基部三段 分別接入培養(yǎng)基 nullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull 糖 nullnullnull nullnull 瓊脂 nullnull null 中 花絲段平放 用鑷子頭輕輕按壓花絲 使兩端 切口一半嵌入固體培養(yǎng)基中 nullnullnullnull 培養(yǎng)與觀察 null 將接種好的外植體放置在室 溫 nullnullnullnull null 光照強度 nullnullnullnullnullnullnull 每日光照 nullnullnull 的 培養(yǎng)室 每隔 nullnull 觀察外植體生長情況 分別統(tǒng)計誘 導出愈傷組織 分化出不定芽和污染褐化的外植體 數(shù)量 誘導愈傷率 null 誘導出愈傷組織的外植體數(shù) 未發(fā)生污染的接種外植體數(shù) nullnullnullnullnull 不定芽分化率 null 產生不定芽的外植體數(shù) 未 發(fā)生污染的接種外植體數(shù) nullnullnullnullnull nullnull 結果與分析 nullnullnull 不同基因型花絲誘導愈傷組織及不定芽分化 的差異 不同基因型花絲誘導愈傷組織及不定芽分化 的差異見表 null 以花絲為外植體進行組織培養(yǎng) 探 討培養(yǎng)基的適用性及不同基因型花絲誘導愈傷組 織及不定芽分化差異的難易程度 所用的培養(yǎng)基 配方是北京農學院百合研究課題組多年百合組織 培養(yǎng)實踐研究所得 并參考其他研究成果即對不同 品種及原生種百合的花器官進行組織培養(yǎng) 且成功 誘導分化出不定芽 null null nullnullnull 利用該培養(yǎng)基進行組織 nullnullnullnull 年第 null 期 哈麗則熱姆 賽達合買提 等 不同基因型百合花絲組織培養(yǎng)研究 nullnullnull 培養(yǎng) null 個百合新品種 品系 均能成功誘導分化出 不定芽 說明該配方對不同基因型的百合花絲誘導 具有普遍適用性 有生產實踐應用的可能 不同基因型百合誘導得到愈傷組織所用的時 間各不相同 白特里 昂菲特 誘導愈傷率最高 為 nullnullnullnullnullnull 文雅王子 和 白天堂 相接近分別為 nullnullnullnullnull nullnullnullnullnull 亞洲百合新品系 nullnull 誘導愈傷率 為 nullnullnullnull 而大花卷丹最低為 nullnullnullnullnull 白特里 昂菲特 在接種 nullnullnull 后 花絲切口處顏色開始發(fā)生 變化切口膨大 培養(yǎng) nullnullnull 后 切口處出現(xiàn)顆粒狀愈 傷組織 培養(yǎng) nullnullnull 后 愈傷組織逐漸增多 文雅王 子 和 白天堂 在接種 nullnullnull 后 花絲切口處顏色開 始發(fā)生變化并且膨大 培養(yǎng) nullnull 后 切口處出現(xiàn)愈 傷組織 亞洲百合新品系 nullnull 和大花卷丹 在接種 nullnullnull 后 切口處無明顯變化 培養(yǎng) nullnullnull 后 切口處出 現(xiàn)少量顆粒狀愈傷組織 不同基因型百合分化成不定芽所用的時間和 分化率存在較大差異 白特里 昂菲特 誘導分 化率最高為 nullnullnullnullnullnull 文雅王子 和 白天堂 相接 近分別為 nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 亞洲百合新品系 nullnull 為 nullnullnullnull 大花卷丹為 nullnullnullnullnull 白特里 昂菲特 在 接種 nullnullnull 后 愈傷組織邊緣出現(xiàn)少量不定芽 培養(yǎng) nullnullnull 后 大量叢生芽長出 文雅王子 和 白天堂 在接種 nullnullnull 后 開始長出少量不定芽 培養(yǎng) nullnullnull 后 叢生芽逐漸增多 亞洲百合新品系 nullnull 在接種 nullnullnull 后 有少數(shù)不定芽長出 部分出現(xiàn)污染和褐化現(xiàn)象 大花卷丹在培養(yǎng) nullnullnull 后 大部分出現(xiàn)褐化現(xiàn)象沒有 長出不定芽 該試驗所用培養(yǎng)基對大多數(shù)基因型百合花絲 誘導分化均適用 但不同基因型在產生愈傷組織及 不定芽分化時存在差異 依次為 白特里 昂菲特 null 文雅王子 null 白天堂 null 亞洲百合新品系 nullnullnull 大 花卷丹 表null null 不同基因型百合花絲愈傷誘導率及分化率 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 百合 nullnullnullnull 品系 nullnullnullnull 接種數(shù) nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 誘導愈傷率 null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 誘導分化率 null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 白特里 昂菲特 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnull 文雅王子 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnull 白天堂 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnull 亞洲百合新品系nullnull null nullnullnull null nullnullnullnull nullnullnull 大花卷丹nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnullnull nullnullnullnull nullnullnull nullnullnull 花絲不同部位誘導愈傷組織及不定芽分化的 差