月季無(wú)菌材料的獲得及不定芽的誘導(dǎo).pdf

霍建勇 中國(guó)番茄產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及安全防范 蔬菜 苗 衛(wèi) 東 高 換 超 李 俊 濤 等 月 季 無(wú) 菌 材 料 的 獲 得 及 不 定 芽 的 誘 導(dǎo) 江 蘇 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 月 季 無(wú) 菌 材 料 的 獲 得 及 不 定 芽 的 誘 導(dǎo) 苗衛(wèi)東 高換超 李俊濤 王宇揚(yáng) 李凱薇 河南科技學(xué)院園藝園林學(xué)院 河南新鄉(xiāng) 摘 要 月季花大而香 是名貴的觀賞植物 但采用常規(guī)的扦插和嫁接繁殖方法進(jìn)行繁殖成活率不高 采用霍爾恩 月季一年生枝條為外植體進(jìn)行離體培養(yǎng)以擴(kuò)大繁殖系數(shù) 試驗(yàn)首先以 為基本培養(yǎng)基 添加不同濃度的植物生長(zhǎng) 調(diào)節(jié)劑 研究不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)月季萌芽率及生長(zhǎng)情況的影響 然后用獲得的月季無(wú)菌苗葉片為材料 以 為 基本培養(yǎng)基 研究不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑及暗培養(yǎng)時(shí)間等多種因素對(duì)霍爾恩月季葉片不定芽誘導(dǎo)再生的影響 結(jié)果表 明 月季腋芽萌發(fā)較適合的培養(yǎng)基為 蔗糖 瓊脂粉 繼代培養(yǎng)較 適合的培養(yǎng)基為 蔗糖 瓊脂粉 對(duì)葉片不定芽再生有誘導(dǎo) 作用 最適的培養(yǎng)基為 蔗糖 瓊脂粉 暗培養(yǎng)時(shí)間為 葉片的 不定芽最高誘導(dǎo)率為 關(guān) 鍵 詞 霍爾恩月季 無(wú)菌苗 葉片 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑 不定芽 中 圖 分 類(lèi) 號(hào) 文 獻(xiàn) 標(biāo) 志 碼 文 章 編 號(hào) 收稿日期 作者簡(jiǎn)介 苗衛(wèi)東 男 河南遂平人 副教授 主要從事園藝 植物資源評(píng)價(jià)與利用研究 月季被譽(yù)為 花中皇后 是世界上最重要的觀 賞植物之一 以其花朵美麗 四季常開(kāi) 花色豐富和 香色濃郁 一直被大眾所喜歡 并且它還有非常廣 泛的應(yīng)用價(jià)值 是城市綠化的主要材料 月季的自 然花期為 月至 月 花大型 有香氣 廣泛用于園 藝栽培和切花生產(chǎn) 中國(guó)是月季的原產(chǎn)地之一 中國(guó)有 個(gè)城市把它作為市花 霍爾恩月季是豐 花月季的一個(gè)品種 長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)健 分枝旺盛 株形優(yōu) 美 主干及側(cè)分支不明顯 為灌叢生長(zhǎng) 其葉片刺體 與雜種茶香月季相比略小 植株偏矮 通常在 霍爾恩月季花朵顏色呈深玫紅色 重瓣 花 朵直徑 香氣宜人 霍爾恩月季花期不斷 群體 栽植觀賞性較高 現(xiàn)代月季品種有 多個(gè) 月季傳統(tǒng)的繁育方法如扦插 嫁接等具有一定的局 限性 繁殖速度慢 種苗容易退化 對(duì)月季進(jìn)行離體 培養(yǎng) 可以在短時(shí)間內(nèi)獲得優(yōu)質(zhì)苗 而且可以周年 進(jìn)行生產(chǎn) 目前 對(duì)月季組培的研究主要集中在離 體快繁方面 關(guān)于植株再生體系的建立報(bào)道較 少 建立高效的月季再生體系是開(kāi)展月季基因工程 育種的前提 有關(guān)建立月季再生體系有 條途徑 即器官發(fā)生途徑和體細(xì)胞胚途徑 本試驗(yàn)采用離 體快繁的方法獲得大量的月季無(wú)菌材料 用其無(wú)菌 材料的葉片作為外植體 通過(guò)器官發(fā)生途徑建立了 月季不定芽再生的體系 為月季的轉(zhuǎn)基因奠定了一 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 年第 卷第 期 定基礎(chǔ) 材 料 與 方 法 材料 試驗(yàn)于 年 月開(kāi)展 材料采自河南新 鄉(xiāng)河南科技學(xué)院月季種質(zhì)資源圃 采摘的月季品種 為霍爾恩 于 左右選擇生長(zhǎng)健壯的植株取 年生長(zhǎng)勢(shì)好 無(wú)病蟲(chóng)害 芽體飽滿的月季中部枝條 誘導(dǎo)不定芽再生的材料是在河南科技學(xué)院園藝植 物組培實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過(guò)繼代培養(yǎng) 的無(wú)菌苗 取其 葉片 方法 月季腋芽初代培養(yǎng) 取 年生長(zhǎng)勢(shì)好 無(wú)病 蟲(chóng)害 芽體飽滿的月季中部枝條 從大田取回后 除去葉片與莖刺 然后在流水下沖洗 洗去灰 塵 然后加入適量洗潔精沖洗 后剪成帶 個(gè)芽 體的莖段 在超凈工作臺(tái)上用 氯化汞消毒 然后使用無(wú)菌水沖洗 次 每次沖洗 并 不斷搖晃徹底沖洗殘留的氯化汞 用無(wú)菌濾紙把接 種材料上的水吸干 把處理好的材料接種于以 為基本培養(yǎng)基 添加不同濃度的 和 組合的 種初代培養(yǎng)基上 設(shè)置的培養(yǎng)基分別為 蔗糖 瓊脂粉 值 每種培養(yǎng)基接種 瓶 每瓶 接種 個(gè)外植體 重復(fù) 次 共 瓶 接種好外植體 后放在培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng) 培養(yǎng)溫度為 光 照度為 月季腋芽繼代培養(yǎng) 培養(yǎng) 后 由于初 代培養(yǎng)時(shí)材料帶莖段容易污染 所以把初代培養(yǎng)生 長(zhǎng)良好的腋芽剪下 進(jìn)行轉(zhuǎn)接至以 為基本培 養(yǎng)基 添加不同濃度 和 組合的 種繼代培 養(yǎng)基上 培養(yǎng)基分別 蔗糖 瓊脂粉 值 在培養(yǎng)過(guò)程中一旦發(fā)現(xiàn)污染要及時(shí)處理 在培 養(yǎng)過(guò)程中要不斷觀察其生長(zhǎng)情況 月季無(wú)菌苗葉片愈傷組織的誘導(dǎo) 選擇生 長(zhǎng)勢(shì)良好 無(wú)污染的繼代培養(yǎng) 的無(wú)菌苗 將無(wú) 菌苗葉片剪成適當(dāng)大小 在葉脈中部橫切幾下進(jìn)行 刻傷 葉背向下分散接種到以 為基本培養(yǎng)基 添 加不同濃度 的 種愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基 上 培養(yǎng)基分別為 蔗糖為 瓊脂粉 為 值為 每種培養(yǎng)基接種 瓶 每 瓶接 個(gè)外植體 重復(fù) 次 共 瓶 培養(yǎng)溫度為 光照度為 光照 接種 后觀察愈傷組織的狀態(tài)變化 統(tǒng)計(jì)愈傷組 織誘導(dǎo)率 愈傷組織誘導(dǎo)率 產(chǎn)生愈傷的外植體 數(shù) 接種外植體數(shù) 月季無(wú)菌苗不定芽的誘導(dǎo) 將培養(yǎng) 生 長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接至以 為基本培養(yǎng)基 植 物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑 與 不同濃度組合 種不 定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上 培養(yǎng)基分別為 對(duì)照 蔗糖為 瓊脂粉為 值為 每種培養(yǎng)基 接種 瓶 每瓶接 塊愈傷組織 每個(gè)組合分別暗 培養(yǎng) 重復(fù) 次 共 瓶 然后放置在 培養(yǎng)溫度為 光照度為 光照下培養(yǎng) 及時(shí)觀察不定芽誘導(dǎo)情況并在培 養(yǎng) 后統(tǒng)計(jì)不定芽誘導(dǎo)率 不定芽誘導(dǎo)率 誘 導(dǎo)出不定芽的愈傷數(shù) 接種的愈傷數(shù) 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 年第 卷第 期 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析 試 驗(yàn)數(shù)據(jù)為 次重復(fù)的平均值 結(jié) 果 與 分 析 不同培養(yǎng)基對(duì)月季腋芽萌發(fā)率的影響 通過(guò)試驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)莖段培養(yǎng) 后 腋芽開(kāi)始 萌動(dòng)膨大 培養(yǎng) 后芽體高達(dá) 初代培養(yǎng) 后芽體長(zhǎng)度達(dá) 此時(shí)開(kāi)始統(tǒng)計(jì)萌發(fā)個(gè)數(shù) 然后把生長(zhǎng)良好的芽體切 下轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基上 從表 可以看出 這 種組合都能使莖段腋芽 萌發(fā) 培養(yǎng)基 較適合腋芽萌發(fā) 萌發(fā)率為 長(zhǎng)勢(shì)好 圖 培養(yǎng)基腋芽萌發(fā)率最 低 萌發(fā)率為 長(zhǎng)勢(shì)慢 圖 培養(yǎng)基 與培養(yǎng)基 差異顯著 培 養(yǎng)基 之間差異不顯著 不同培養(yǎng)基對(duì)月季繼代培養(yǎng)的影響 通過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn) 腋芽莖段在初代培養(yǎng)基上培養(yǎng) 后把其切下轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基上 生長(zhǎng)良 好 葉片開(kāi)始展開(kāi) 圖 在 培養(yǎng)基上培養(yǎng) 后植株高度達(dá) 圖 培養(yǎng) 后植株高度達(dá) 圖 表 不 同 培 養(yǎng) 基 對(duì) 月 季 腋 芽 萌 發(fā) 率 的 影 響 培養(yǎng)基 接種外植體 個(gè) 萌發(fā)數(shù) 個(gè) 萌發(fā)率 注 表中萌發(fā)率數(shù)據(jù)為平均值 標(biāo)準(zhǔn)差 同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě) 字母表示不同培養(yǎng)基間差異顯著 表 至表 同 從表 可以看出 培養(yǎng)基 較適合月季繼代生 長(zhǎng) 培養(yǎng)基 與培養(yǎng)基 之間差異不顯著 都適合 其生長(zhǎng) 但是 培養(yǎng)基最初植株生長(zhǎng)較快 但是在 繼代培養(yǎng)了 后葉片開(kāi)始變黃 植株質(zhì)量較差 所以只有培養(yǎng)基 最適合月季繼代培養(yǎng) 培養(yǎng)基 最不適合月季的繼代培養(yǎng) 不同培養(yǎng)基對(duì)月季無(wú)菌苗葉片愈傷組織誘導(dǎo) 的影響 從表 可以看出 培養(yǎng)基中不加 時(shí)無(wú) 法誘導(dǎo)出愈傷組織 最適合誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基 為 誘導(dǎo)率最高 為 培養(yǎng)基 誘導(dǎo)率 為 與 之間差異不顯著 說(shuō)明這 種 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 年第 卷第 期 表 不 同 培 養(yǎng) 基 對(duì) 月 季 繼 代 培 養(yǎng) 的 影 響 培養(yǎng)基 株高 幼苗長(zhǎng)勢(shì) 生長(zhǎng)慢 細(xì)弱 生長(zhǎng)慢 細(xì)弱 生長(zhǎng)慢 細(xì)弱 生長(zhǎng)慢 細(xì)弱 生長(zhǎng)快 質(zhì)量好 生長(zhǎng)較快 質(zhì)量好 生長(zhǎng)較快 顏色黃 生長(zhǎng)較快 細(xì)弱 生長(zhǎng)較快 節(jié)間長(zhǎng)細(xì)弱 培養(yǎng)基都較適合月季愈傷組織的誘導(dǎo) 與 組合 之間差異顯著 其中 與 之間差異顯著性較小 與 之間差異顯著性較大 與 差異顯著性最大 通過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn) 不同濃度的 對(duì)愈傷組 織發(fā)生的時(shí)間 愈傷組織生長(zhǎng)質(zhì)量有很大影響 從 圖 可以看出 當(dāng)不加 時(shí)不能產(chǎn)生愈傷組 織 材料培養(yǎng) 后全部變褐死亡 圖 當(dāng)加 葉塊在培養(yǎng) 后在靠近切口卷 曲處長(zhǎng)出少許的淡綠色愈傷組織 在后期的觀察中 愈傷組織膨大生長(zhǎng)緩慢 愈傷組織質(zhì)地緊密 圖 當(dāng)加入 在培養(yǎng) 后葉柄切 口長(zhǎng)出少許的綠色愈傷組織 葉塊開(kāi)始卷曲上翹長(zhǎng) 出少量愈傷組織 后愈傷組織繼續(xù)膨大 后葉塊幾乎長(zhǎng)出全部鮮綠色愈傷組織 圖 當(dāng)加 在培養(yǎng)初期愈傷組織長(zhǎng)得很 快 但生長(zhǎng)約 后長(zhǎng)出的綠色愈傷組織開(kāi)始變黃 綠色 圖 當(dāng)加入 在生長(zhǎng) 時(shí)葉塊切口處開(kāi)始膨大 但是有很多材料開(kāi)始 變褐 后期長(zhǎng)出的少許愈傷組織不再繼續(xù)膨大 最 后幾乎全部變褐死亡 圖 表 不 同 培 養(yǎng) 基 對(duì) 無(wú) 菌 苗 葉 片 愈 傷 組 織 誘 導(dǎo) 的 影 響 培養(yǎng)基 接種數(shù) 塊 愈傷組織數(shù) 塊 愈傷組織誘導(dǎo)率 愈傷組織狀態(tài) 無(wú)愈傷組織產(chǎn)生 量少 綠色質(zhì)地緊密 量較多 淡綠色 疏松程度適中 量較多 黃綠色 質(zhì)地疏松 量較少 黃綠色或褐色 質(zhì)地疏松 暗培養(yǎng)天數(shù)和不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑組合對(duì)月 季不定芽誘導(dǎo)率的影響 從表 可以看出 霍爾恩月季誘導(dǎo)不定芽最適的 培養(yǎng)基為 誘導(dǎo)率最高 與 誘導(dǎo)率最低 說(shuō)明 在月 季不定芽誘導(dǎo)中起決定性作用 不添加 無(wú)法誘 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 年第 卷第 期 導(dǎo)出不定芽 和其他 個(gè)組合差異顯著 和 差異顯著性較小 說(shuō)明 濃度對(duì)不定芽誘導(dǎo) 率影響不大 和 差異顯著 說(shuō)明 濃度對(duì) 不定芽誘導(dǎo)有很大影響 和其他 個(gè)組合差異顯 著 在試驗(yàn)過(guò)程中還發(fā)現(xiàn) 月季無(wú)菌苗葉片主要在 主脈切口處產(chǎn)生愈傷組織 月季不定芽誘導(dǎo)率很 低 最高誘導(dǎo)率僅為 由圖 可以看出 在 培養(yǎng)基培養(yǎng) 后有芽將要長(zhǎng)出 后長(zhǎng)出少許 的不定芽 表 不 同 培 養(yǎng) 基 對(duì) 月 季 無(wú) 菌 苗 不 定 芽 誘 導(dǎo) 率 的 影 響 培養(yǎng)基 接種愈傷數(shù) 塊 出芽愈傷數(shù) 塊 誘導(dǎo)率 討 論 與 結(jié) 論 對(duì)月季不定芽誘導(dǎo)的影響 是一種新型的細(xì)胞分裂素類(lèi)似物 它不但 具有很強(qiáng)的細(xì)胞分裂素活性 而且還具有生長(zhǎng)素的 功能 在基本培養(yǎng)基 上只加 就能誘導(dǎo)赤霞 珠葉片離體再生 對(duì)薔薇科植物誘導(dǎo)不定 芽有促進(jìn)效果 相關(guān)報(bào)道表明 對(duì)體胚發(fā)生 的作用因植物種類(lèi)而異 它對(duì)體胚發(fā)生的促進(jìn)作用 與使用濃度和處理時(shí)間有關(guān) 眾多研究指出 通過(guò)調(diào)節(jié)內(nèi)源植物生長(zhǎng)激素起作用 的 誘導(dǎo)能力雖然很強(qiáng) 但是它也有一定的缺陷 有 研究指出 高濃度的 能誘導(dǎo)愈傷組織形成和體 胚的誘導(dǎo) 但抑制芽的生長(zhǎng)不利于伸長(zhǎng) 再生芽數(shù) 也減少 高麗萍等在建立月季再生體系的研究中 分別采用直接及間接的誘導(dǎo)途徑 建立了薩曼莎月 季的再生體系 生長(zhǎng)素促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)和細(xì)胞分 裂 細(xì)胞分裂素誘導(dǎo)芽分化 促進(jìn)側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng) 細(xì) 胞分裂素配合一定的生長(zhǎng)素可共同促進(jìn)月季側(cè)芽 的萌發(fā)與生長(zhǎng) 本研究發(fā)現(xiàn) 對(duì)不定芽誘導(dǎo)有 明顯影響 低濃度有利于不定芽的誘導(dǎo) 霍爾恩月 季愈傷組織在誘導(dǎo)愈傷培養(yǎng)基上培養(yǎng) 后轉(zhuǎn)到 分化培養(yǎng)基 上 得到不定芽 證明 對(duì)不定芽誘導(dǎo)有促進(jìn) 作用 材料繼代時(shí)間對(duì)月季不定芽誘導(dǎo)的影響 通過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn) 繼代 左右的植株較適合誘 導(dǎo)出愈傷組織 繼代時(shí)間超過(guò) 幾乎無(wú)法誘導(dǎo)出 愈傷組織 長(zhǎng)出的少許愈傷組織變褐嚴(yán)重 無(wú)法誘 導(dǎo)出不定芽 說(shuō)明葉片的幼嫩程度對(duì)其有一定的 影響 參考相關(guān)資料取繼代 的植株小葉 愈傷 組織誘導(dǎo)率較高 同時(shí)有研究指出 隨著愈傷組 織繼代次數(shù)的增加 愈傷組織分化的能力也不斷下 降 當(dāng)繼代次數(shù)超過(guò) 次 大部分的愈傷組織就幾乎 沒(méi)有增殖的能力 本試驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)愈傷組織不能 進(jìn)行多次繼代 即使此試驗(yàn)繼代次數(shù)較少 其分化 情況依然不理想 暗培養(yǎng)時(shí)間對(duì)月季不定芽誘導(dǎo)的影響 在植物離體再生研究中 暗培養(yǎng)時(shí)間對(duì)再生效 率有著非常重要的作用 暗培養(yǎng)時(shí)間過(guò)短不能誘 導(dǎo)再生出不定芽 過(guò)長(zhǎng)植物材料幾乎變褐死亡 通 過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn) 不進(jìn)行暗培養(yǎng)不能產(chǎn)生不定芽 在試 驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)當(dāng)暗培養(yǎng)時(shí)間為 時(shí)鮮綠色的愈傷 組織開(kāi)始轉(zhuǎn)為淡綠色 質(zhì)地開(kāi)始變得稍疏松 當(dāng)暗 培養(yǎng)時(shí)間為 時(shí)愈傷組織過(guò)于結(jié)實(shí) 開(kāi)始變黃褐 色 愈傷組織膨大緩慢 暗培養(yǎng) 長(zhǎng)出的愈傷組 織不再膨大 開(kāi)始變黃變褐死亡 所以在不定芽誘 導(dǎo)過(guò)程中采用 暗培養(yǎng)然后轉(zhuǎn)入光下培養(yǎng) 培養(yǎng) 條件同月季初代培養(yǎng) 月季的再生培養(yǎng)中不同 和 的濃度組合對(duì)不定芽誘導(dǎo)有一定影響 在誘導(dǎo)不定芽階段 暗培養(yǎng)時(shí)間起著決定性的作 用 有研究表明 適當(dāng)?shù)陌蹬囵B(yǎng)時(shí)間能促進(jìn)月季植 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 年第 卷第 期 株再生 本試驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)適當(dāng)?shù)陌蹬囵B(yǎng)有助于 不定芽的誘導(dǎo) 霍爾恩月季不定芽誘導(dǎo)暗培養(yǎng)的最 佳時(shí)間是 不定芽在產(chǎn)生愈傷組織的切口處產(chǎn) 生 相關(guān)研究指出 暗培養(yǎng) 以上不定芽的再生 率可達(dá)到 以上 植株的再生率達(dá)到 以 上 本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn) 暗培養(yǎng)時(shí)間達(dá)到 時(shí)愈傷組 織幾乎全變褐 無(wú)法誘導(dǎo)出不定芽 碳源濃度對(duì)月季不定芽誘導(dǎo)的影響 碳源的種類(lèi)對(duì)植株再生有很大的影響 它除為 細(xì)胞生命活動(dòng)提供能源外 在培養(yǎng)基中還起著維持 一定滲透壓的作用 果糖和乳糖抑制植株再生 蔗 糖和葡萄糖能提高不定芽的誘導(dǎo)率使植株獲得較 高的轉(zhuǎn)化效率 通過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn) 低濃度的蔗糖更 有利于月季無(wú)菌體系的建立與不定芽的再生 對(duì)月季不定芽誘導(dǎo)的影響 相關(guān)研究指出 不同濃度的細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng) 素組合使用 植株再生效果有很大差異 有研究 表明 與 組合使用時(shí) 薔薇植物的再生率 較高 月季愈傷組織在 濃度為 時(shí)分 化出不定芽緩慢而且質(zhì)量差 濃度為 時(shí) 在愈傷組織中誘導(dǎo)出不定芽的時(shí)間短 質(zhì)量好 但是也發(fā)現(xiàn)在此濃度時(shí)愈傷組織有時(shí)無(wú)法誘導(dǎo)出 不定芽而會(huì)誘導(dǎo)出多條根 說(shuō)明生長(zhǎng)素濃度高時(shí)有 利于生長(zhǎng)出根 但是卻無(wú)法在不定芽上誘導(dǎo)出根 所以對(duì)于建立霍爾恩月季不定芽再生體系還要進(jìn) 一步研究 褐化現(xiàn)象對(duì)月季不定芽誘導(dǎo)的影響 相關(guān)研究認(rèn)為 植株必須具有 以上的再生 頻率 每個(gè)植物材料都能誘導(dǎo)出叢生芽 只有這樣 才具有能成功轉(zhuǎn)化的可能 雖然本試驗(yàn)做了很 多對(duì)比研究 但是不定芽誘導(dǎo)率還是很低 原因主 要是月季葉片在誘導(dǎo)愈傷組織的過(guò)程中容易褐化 無(wú)法得到不定芽 得到的少數(shù)不定芽無(wú)法生根長(zhǎng)成 完整植株 相關(guān)研究指出 在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中 褐化現(xiàn)象的發(fā)生也會(huì)影響根的生成 所以 在今 后的工作中應(yīng)該考慮如何控制褐化現(xiàn)象的發(fā)生 提 高植株不定芽誘導(dǎo)率并使其長(zhǎng)成完整植株 本試驗(yàn)中選用月季無(wú)菌苗葉片為材料 以 為基本培養(yǎng)基 采用離體快繁技術(shù)研究不同植物生 長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑及暗培養(yǎng)時(shí)間等多種因素對(duì)霍爾恩月季 葉片不定芽誘導(dǎo)再生的影響 研究得出最適的培 養(yǎng)基為 蔗糖 瓊脂粉 暗培養(yǎng)時(shí)間為 葉 片的不定芽最高誘導(dǎo)率為 參 考 文 獻(xiàn) 張佐雙 朱秀珍 中國(guó)月季 北京 中國(guó)林業(yè)出版社 李 青 蘇雪痕 李湛東 藤本月季組織培養(yǎng)快繁研究 北京 林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) 高莉萍 包滿珠 月季的植株再生及遺傳轉(zhuǎn)化研究進(jìn)展 植 物學(xué)通報(bào) 田傳衛(wèi) 尚愛(ài)芹 張建甫 等 多花薔薇假珠芽誘導(dǎo) 體細(xì)胞胚發(fā) 生及植株高效再生 園藝學(xué)報(bào) 王 禹 微型月季組織培養(yǎng)育苗技術(shù) 中國(guó)林副特產(chǎn) 王錢(qián)錢(qián) 五種月季品種的快繁和再生體系的優(yōu)化探究 合 肥 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 劉子平 趙春莉 李金英 等 紅雙喜月季高效組織培養(yǎng)快繁技術(shù) 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 劉亞娟 楊小艷 謝樹(shù)章 等 芳純?cè)录窘M培快繁技術(shù)研究 西南師范大學(xué)學(xué)報(bào) 自然科學(xué)版 高莉萍 包滿珠 月季薩蔓莎不定芽的直接誘導(dǎo)和植株再生的 研究 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué) 郭艷超 田傳衛(wèi) 尚愛(ài)芹 等 粉團(tuán)薔薇葉片不定芽的直接誘導(dǎo) 及植株再生 分子植物育種 增刊 潘兵兵 個(gè)現(xiàn)代月季品種愈傷組織再生體系的建立與體細(xì)胞 培養(yǎng)的研究 哈爾濱 東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 楊 濤 錢(qián) 蕾 呂永桂 等 豐花月季低成本組織培養(yǎng)快繁的 研究 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 李敬蕊 月季再生體系的建立及葉盤(pán)法轉(zhuǎn)化月季 薩蔓莎 的研 究 武漢 華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 林桂玉 李美芹 呂金浮 等 藤本月季紫皇后組織培養(yǎng)技術(shù) 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 楊永花 張美玲 張新瑞 等 藤本月季組織培養(yǎng)初報(bào) 甘肅 農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) 徐凌飛 馬鋒旺 王喆之 等 梨葉片離體培養(yǎng)和植株再生 園藝學(xué)報(bào) 賈士榮 曹冬孫 轉(zhuǎn)基因植物 植物學(xué)通報(bào) 張俊琦 羅曉芳 牡丹組織培養(yǎng)中褐化的發(fā)生原因與防止方法 的研究 沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 年第 卷第 期