不同栽培輔料誘導(dǎo)對(duì)3個(gè)香菇菌株液體發(fā)酵產(chǎn)漆酶活力的影響.pdf

熊 雪 李 鵬 王 瑩 等 不同栽培輔料誘導(dǎo)對(duì) 個(gè)香菇菌株液體發(fā)酵產(chǎn)漆酶活力的影響 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 不 同 栽 培 輔 料 誘 導(dǎo) 對(duì) 個(gè) 香 菇 菌 株 液 體 發(fā) 酵 產(chǎn) 漆 酶 活 力 的 影 響 熊 雪 李 鵬 王 瑩 向 準(zhǔn) 和耀威 萬(wàn) 誠(chéng) 王成考 貴州省生物研究所 貴州貴陽(yáng) 貴州師范學(xué)院 貴州貴陽(yáng) 摘 要 以南方香菇產(chǎn)業(yè)主栽品種香菇 慶科 以及貴州省特有香菇馬桑香菇為研究對(duì)象 通過(guò)拮抗反應(yīng) 系 統(tǒng)發(fā)育樹(shù)及溫度試驗(yàn) 對(duì)香菇菌株進(jìn)行了區(qū)別性鑒定 并利用堿性木質(zhì)素 純品 及 種食用菌栽培中常用的栽培輔 料為誘導(dǎo)物 研究 種不同香菇菌株液體發(fā)酵產(chǎn)漆酶活力連續(xù) 的變化規(guī)律 研究結(jié)果表明 馬桑香菇 香菇 慶科 雖均同為有機(jī)香菇的下屬分支 但菌株間是有區(qū)別的 馬桑香菇同香菇 和慶科 間的親緣性也較遠(yuǎn) 且兩兩間均有拮抗反應(yīng) 種菌株菌絲生長(zhǎng)對(duì)適宜溫度的選擇也有較小差異 存在一定種源差異 此外 香菇液體產(chǎn) 漆酶活力受菌株遺傳差異和 種不同誘導(dǎo)培養(yǎng)基的影響差異均為極顯著 但各處理漆酶整體變化規(guī)律均 呈現(xiàn)先升后降的趨勢(shì) 對(duì)香菇 產(chǎn)漆酶誘導(dǎo)力最強(qiáng)的是玉米芯 其次為麥麩 最高漆酶活力分別為 對(duì)慶科 產(chǎn)漆酶誘導(dǎo)力最強(qiáng)的是麥麩 其次為玉米芯 最高漆酶活力分別為 對(duì)馬桑香菇 產(chǎn)漆酶誘導(dǎo)力最強(qiáng)的是米糠 其次為麥麩 最高漆酶活力分別為 從誘導(dǎo)漆酶活力強(qiáng)度出發(fā) 香菇 慶科 和馬桑香菇培養(yǎng)的最佳輔料分別為玉米芯 麥麩和米糠 關(guān) 鍵 詞 栽培輔料 香菇 液體發(fā)酵 漆酶活力 中 圖 分 類(lèi) 號(hào) 文 獻(xiàn) 標(biāo) 志 碼 文 章 編 號(hào) 收稿日期 基金項(xiàng)目 貴州科學(xué)院青年基金 編號(hào) 黔科院 字 號(hào) 貴 州省科技計(jì)劃 編號(hào) 黔科合重大專(zhuān)項(xiàng)字 號(hào) 黔科 合支撐 號(hào) 黔科合重大專(zhuān)項(xiàng)字 號(hào) 黔科合支撐 號(hào) 黔科合支撐 一般 貴州省食用菌產(chǎn)業(yè)體系項(xiàng)目野生菌保護(hù)撫育與馴化功能實(shí) 驗(yàn)室建設(shè)專(zhuān)項(xiàng) 作者簡(jiǎn)介 熊 雪 女 貴州貴陽(yáng)人 碩士 研究實(shí)習(xí)員 主要 從事菌物生態(tài)及食用菌栽培相關(guān)研究 通信作者 向 準(zhǔn) 碩士 副研究員 主要從事食用菌品種選育與栽培 研究 木質(zhì)纖維素作為自然界中儲(chǔ)量巨大的潛在綠 色資源 廣泛存在于各種農(nóng)林廢棄物中 在自然界 中主要靠微生物進(jìn)行降解 主要包含纖維素 半纖 維素 木質(zhì)素和少量果膠 其中木質(zhì)素是一種以 個(gè)或多個(gè)苯酚丙烷為單位組成的復(fù)雜聚合物 這 類(lèi)物質(zhì)在自然界中主要被真菌代謝產(chǎn)生的胞外 酶 多酚氧化酶降解 這類(lèi)酶主要包括漆酶 多酚氧化酶 過(guò)氧化物 酶 類(lèi) 其中 漆酶是分解木質(zhì)素最 具代表性的酶類(lèi) 也是目前被廣大學(xué)者研究最多 的酶類(lèi) 漆酶是一種含銅的多酚氧化酶 主要存在 于植物和真菌中 其中植物漆酶主要參與形成木質(zhì) 素 而真菌漆酶的作用則是降解木質(zhì)素 早在 年 等就曾指出 漆酶分解木質(zhì)素的同時(shí) 會(huì)產(chǎn)生一些有毒物質(zhì) 主要是酚類(lèi)或醌類(lèi)化合物 這些物質(zhì)可抑制雜菌的生長(zhǎng) 是很好的殺菌劑 嚴(yán)培蘭等在對(duì)黑木耳 a aa a 的研究 中也指出 漆酶活性高的黑木耳菌株 栽培產(chǎn)量也 較高 其抗霉能力也高 任鵬飛等提出 菌絲的 生物降解能力會(huì)受酶活大小的影響 通常來(lái)說(shuō)產(chǎn)漆 酶能力強(qiáng)的菌株其菌絲生長(zhǎng)速度較快 唐菊 等研究表明 漆酶在食用菌生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中除了參 與培養(yǎng)料中木質(zhì)素的降解 對(duì)原基分化 子實(shí)體的 形態(tài)建成和發(fā)育還具有調(diào)控作用 眾多研究表 明 漆酶在食用菌生產(chǎn)中是一種可以間接反映食用 菌菌絲活力 產(chǎn)量和品質(zhì) 直接反映木質(zhì)素降減情 況的酶類(lèi) 食用菌產(chǎn)業(yè)的大力發(fā)展作為脫貧攻堅(jiān)勝利的 助力之一 也繼續(xù)成為鄉(xiāng)村振興的重要抓手 其栽 培規(guī)模廣 用料大 給生態(tài)環(huán)境帶來(lái)了一定壓力 近年來(lái) 在貴州食用菌的栽培規(guī)模不斷加大 品種 主要是以香菇 a 木耳等木腐菌 在 產(chǎn)量與產(chǎn)值喜人的同時(shí)不可避免地增大了木材用 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 年第 卷第 期 量的壓力 其菌棒主要原料為木屑 棉籽殼 玉米 芯 麥麩 秸稈 米糠等農(nóng)林廢棄物是常見(jiàn)的栽培輔 料 本試驗(yàn)以南方香菇產(chǎn)業(yè)主栽品種香菇 慶 科 以及貴州省特有香菇馬桑香菇為研究對(duì)象 研究香菇菌株間的區(qū)別性差異 并利用堿性木質(zhì)素 純品 及棉籽殼 玉米芯 麥麩和米糠 種輔料為 誘導(dǎo)物 探索 種香菇菌株在不同誘導(dǎo)培養(yǎng)基中液 體發(fā)酵產(chǎn)漆酶活力變化 旨在為貴州省本土香菇生 產(chǎn)中輔料的添加提供一定科學(xué)依據(jù) 材 料 與 方 法 供試菌株 馬桑香菇 香菇 及慶科 菌株由貴州省 食用菌工程技術(shù)研究中心提供 保存于貴州省生物 研究所 培養(yǎng)基 培養(yǎng)基 馬鈴薯 去皮 葡萄糖 瓊脂粉 去離子水 值自然 滅菌 綜合培養(yǎng)基 馬鈴薯 去皮 葡 萄糖 磷酸二氫鉀 硫酸鎂 維生素 瓊脂粉 去離子水 值自然 滅菌 種子液培養(yǎng)基 馬鈴薯 去皮 葡萄 糖 酵母膏 定容至 滅菌 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 葡萄糖 蛋白胨 七水硫酸鎂 三水磷酸氫二 鉀 磷酸二氫鉀 定容至 滅菌 誘導(dǎo)培養(yǎng)基 在 節(jié)中基礎(chǔ)培養(yǎng)基 配方基礎(chǔ)上分別加入 孔徑粒度為 目的 堿性木質(zhì)素 棉籽殼 玉米芯 麥麩 米糠 定容至 滅菌 香菇菌株間的區(qū)別性鑒定 年 月 于貴州省生物研究所微生物實(shí)驗(yàn) 室 將保存的馬桑香菇 香菇 慶科 分別接種 于 綜合培養(yǎng)基平板上 恒溫活化培養(yǎng) 拮抗試驗(yàn) 接種組合為 組 第 組 同種 供檢菌種 于同一 平板上各接種 個(gè)接種塊 第 組 供檢菌株兩兩接種于同一 平板上 相峙培養(yǎng) 建立香菇系統(tǒng)發(fā)育樹(shù) 采用購(gòu)買(mǎi)的生工生 物工程 上海 股份有限公司 柱式真菌基因組 抽提試劑盒提取分離純化 種香菇菌株基因 組 提取之后的 選用真菌通用引物 進(jìn)行 擴(kuò)增 采用 的 反應(yīng)體系 基因組 和 各 a 前向引物 后 向引物 加雙蒸水至 反 應(yīng)程序?yàn)?預(yù)變性 變性 個(gè)循環(huán) 退火 個(gè)循環(huán) 延伸 個(gè)循環(huán) 延伸 終止反應(yīng)保存 擴(kuò)增得到的 產(chǎn)物經(jīng) 瓊脂糖電泳檢測(cè)擴(kuò)增結(jié)果后 送 生工生物工程 上海 股份有限公司測(cè)序 測(cè)序后登 錄 對(duì)比 通過(guò) 對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行比對(duì) 分析 下載最相近菌株的 序列 并構(gòu)建系 統(tǒng)發(fā)育樹(shù) 不同溫度生長(zhǎng)速度測(cè)定 取 種香菇備用 活化平板 使用打孔器打取直徑 接種物 接種 于 平板上 分別置于 下培 養(yǎng) 觀察菌絲生長(zhǎng)情況 菌絲生長(zhǎng)速度測(cè)定采用 十 字交叉法 從菌絲萌發(fā)開(kāi)始 每 測(cè)量 次 同時(shí)記錄菌絲萌發(fā)時(shí)間 菌絲日均生長(zhǎng)速度以吃料 后菌落平均每日直徑增長(zhǎng)量統(tǒng)計(jì) 菌絲鋪滿(mǎn)平板 時(shí) 觀察記錄菌落的菌絲形態(tài) 色澤 菌落形狀 菌 絲長(zhǎng)勢(shì)和邊緣特征等 用 表示菌絲的長(zhǎng) 勢(shì) 越多表示菌絲生長(zhǎng)得越好 越健壯 均勻 表示菌絲不生長(zhǎng) 漆酶活力測(cè)定 發(fā)酵培養(yǎng) 使用打孔器打取直徑 接 種物 每 完全培養(yǎng)基中無(wú)菌條件下放入 個(gè) 接種物 搖床避光培養(yǎng) 后取 勻漿機(jī)將三角瓶?jī)?nèi)的菌絲球攪拌 使其成均質(zhì) 體 分別向 含不同基質(zhì)培養(yǎng)料的誘導(dǎo)培養(yǎng) 基 中加入 攪拌均勻的香菇均質(zhì)體 于 搖床避光培養(yǎng) 每個(gè)處理 個(gè) 重復(fù) 漆酶活力的測(cè)定 參照韓美玲等的研究 測(cè)定漆酶活力 從培養(yǎng)后 開(kāi)始測(cè)定其漆酶活 力 連續(xù)測(cè)至培養(yǎng) 數(shù)據(jù)處理 利用 進(jìn)行圖表整理 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 年第 卷第 期 對(duì)菌絲日均生長(zhǎng)速度 漆酶活力數(shù)據(jù)分別進(jìn)行顯著 性分析和雙因素方差檢驗(yàn) 結(jié) 果 與 分 析 香菇菌株間的區(qū)別性鑒定 拮抗試驗(yàn) 從圖 可以看出 馬桑香菇 香 菇 慶科 菌株自身均無(wú)拮抗反應(yīng) 但馬桑香 菇同香菇 之間有輕微的隆起 慶科 之間有 明顯的拮抗帶 而香菇 同慶科 間也有明顯 的拮抗帶 綜上說(shuō)明 種香菇菌株彼此間皆有拮 抗反應(yīng) 說(shuō)明 種香菇菌株種源存在一定差異性 建立香菇系統(tǒng)發(fā)育樹(shù) 種香菇菌株的 提取結(jié)果見(jiàn)圖 香菇菌株 條帶清晰 的濃度 純度以及產(chǎn)率均比較高 可用于 擴(kuò)增 經(jīng) 擴(kuò)增和序列測(cè)定 結(jié)果顯示 種香菇菌 株 區(qū)段長(zhǎng)度在 之間 且所得 序列經(jīng) 搜索 擊中結(jié)果均為 a 下載其相近序列 條 并結(jié)合香菇屬其他種 序列 a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a 每種隨機(jī)挑選 條 共同構(gòu)建系 統(tǒng)發(fā)育樹(shù) 圖 系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)表明 同 種供試菌 株 序列親緣性較高的香菇屬種有 a a a a a a a a 且 種菌株集中于 a 同一分支上 菌株間 慶科 和香菇 分支較近 相似系數(shù)較高 親 緣性較近 同馬桑香菇的分支較遠(yuǎn) 相似系數(shù)低 親 緣性較遠(yuǎn) 說(shuō)明 種香菇菌株雖同為香菇屬下有機(jī) 香菇 但仍存在一定差異 不同溫度條件對(duì) 種香菇生長(zhǎng)的影響 從 表 可以看出 在所選供試溫度條件下 馬桑香菇菌 落為絨毛狀白色圓形菌落 日均生長(zhǎng)速度隨溫度的 升高呈現(xiàn)先增后降的趨勢(shì) 并于溫度 條件下達(dá) 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 年第 卷第 期 到峰值 且顯著高于其他溫度處理 其次依次為 且在 菌絲長(zhǎng)勢(shì)最佳 其次為 說(shuō)明馬桑香菇菌絲生長(zhǎng)適宜溫度范圍為 最佳生長(zhǎng)溫度為 在供試溫度范圍內(nèi) 香菇 菌絲呈絨毛狀白 色圓形菌落 其日均生長(zhǎng)速度隨溫度升高先增加后 減少 并于 達(dá)到最大值 日均生長(zhǎng) 速度整體呈現(xiàn)出 的趨勢(shì) 且在 條件下菌絲長(zhǎng)勢(shì)最佳 說(shuō)明香菇 菌絲的 適宜生長(zhǎng)溫度為 最佳溫度為 慶科 在所設(shè)溫度范圍內(nèi) 日均生長(zhǎng)速度也 隨溫度升高先增加后減少 峰值出現(xiàn)在 條件 下 達(dá) 且長(zhǎng)勢(shì)最佳 日均生長(zhǎng)速度其次 依次為 長(zhǎng)勢(shì) 也僅次于 說(shuō)明慶科 的適宜生長(zhǎng)溫度范 圍為 最佳溫度為 綜上可知 種香菇菌株在所設(shè)溫度范圍下菌 落形態(tài)受溫度影響較小 菌絲生長(zhǎng)隨溫度變化趨勢(shì) 大致相同 且菌絲生長(zhǎng)速度在高溫和低溫下受脅迫 明顯 最適溫度均為 但 種菌株對(duì)中高溫和 中低溫有不同的傾向性選擇 不同菌株對(duì)漆酶活力的影響 雙因素方差檢驗(yàn)結(jié)果顯示 香菇不同菌株在不 同培養(yǎng)基中的產(chǎn)漆酶能力各不相同 且在整個(gè)培養(yǎng) 過(guò)程中 除培養(yǎng) 外 菌株和培養(yǎng)基交互影響為顯 著 外 香菇液體產(chǎn)漆酶活力受菌株遺傳 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 年第 卷第 期 表 不 同 溫 度 條 件 對(duì) 種 香 菇 生 長(zhǎng) 的 影 響 菌種 溫度 日均生長(zhǎng)速度 菌落長(zhǎng)勢(shì) 菌落描述 馬桑香菇 絨毛狀白色圓形菌落 邊緣整齊 絨毛狀白色圓形菌落 邊緣整齊 絨毛狀白色圓形菌落 邊緣整齊 絨毛狀白色圓形菌落 邊緣整齊 絨毛狀白色圓形菌落 邊緣整齊 香菇 絨毛狀白色圓形菌落 邊緣整齊 絨毛狀白色圓形菌落 邊緣整齊 絨毛狀白色圓形菌落 邊緣整齊 絨毛狀白色圓形菌落 邊緣整齊 絨毛狀白色圓形菌落 邊緣整齊 慶科 絨毛狀白色圓形菌落 邊緣整齊 絨毛狀白色圓形菌落 邊緣整齊 絨毛狀白色圓形菌落 邊緣整齊 絨毛狀白色圓形菌落 邊緣整齊 絨毛狀白色圓形菌落 邊緣較整齊 注 同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示處理間差異顯著 萌發(fā)時(shí)間為 差異和 種不同誘導(dǎo)培養(yǎng)基的影響均為極顯著 從表 圖 可知 連續(xù) 測(cè)試中 同一誘導(dǎo) 培養(yǎng)基上 種香菇菌株液體產(chǎn)漆酶活力差距明顯 且菌株對(duì)漆酶活力皆具有極顯著的影響 表 種誘導(dǎo)培養(yǎng)基 對(duì)不 同香菇漆酶活 性的影 響 雙因素方 差 檢驗(yàn) 培養(yǎng)時(shí)間 漆酶活性 菌株 培養(yǎng)基 菌株 培養(yǎng)基 注 整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中 在僅含堿性木質(zhì)素的誘導(dǎo)培 養(yǎng)基 中馬桑香菇菌株較其他 種菌株 表現(xiàn)出更高的漆酶活力 且最大漆酶活力為 出現(xiàn)在培養(yǎng) 香菇 最大漆酶活力 為 出現(xiàn)在培養(yǎng) 慶科 在培養(yǎng) 方檢測(cè)出較弱的漆酶活性 在培養(yǎng) 后漆酶活力 較大 達(dá) 在含棉籽殼 玉 米芯 的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中 菌株香菇 分泌漆酶的能力明顯高于其他菌株 最大漆酶活力 均出現(xiàn)在培養(yǎng) 分別為 菌 株馬桑香菇和慶科 最大漆酶活力值均在培養(yǎng) 且馬桑香菇分泌漆酶的能力最低 在 培養(yǎng)基中僅為 在 培養(yǎng) 基中為 在含麥麩的誘導(dǎo)培養(yǎng)基 中 菌株慶科 具有較高的分泌漆酶的能力 并在培養(yǎng) 后達(dá)到最高 為 菌株馬 桑香菇漆酶活力在培養(yǎng) 最先達(dá)到頂峰 但值較 低 為 且在達(dá)到極值后迅速下降 菌株 香菇 在培養(yǎng) 出現(xiàn)極值 達(dá) 在 含米糠的誘導(dǎo)培養(yǎng)基 中 慶科 的產(chǎn) 漆酶能力最低 且培養(yǎng)前期較不穩(wěn)定 在培養(yǎng) 出現(xiàn)極值 為 而香菇 在培養(yǎng)培養(yǎng) 后漆酶活力急速上升 在培養(yǎng) 達(dá)到峰值為 后緩慢下降 馬桑香菇在培養(yǎng)到 后 漆酶活力上升較快 并在培養(yǎng) 出現(xiàn)峰值為 隨后快速降低 綜上所述 在培養(yǎng)初期所有處理下 種香菇菌 株產(chǎn)漆酶活力均較低 在培養(yǎng)中后期漆酶活力 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 年第 卷第 期 較為旺盛 峰值也主要集中在培養(yǎng) 內(nèi) 故 以培養(yǎng)期所有處理漆酶活力均較為旺盛的培養(yǎng) 數(shù)據(jù)為依據(jù)可知 在含堿性木質(zhì)素 米 糠 的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中 馬桑香菇產(chǎn)漆酶活 力高于其他菌株 分別為 在含 棉籽殼 玉米芯 的誘導(dǎo)培 養(yǎng)基中 香菇 產(chǎn)漆酶活力高于其他菌株 分別為 而在含麥麩 的誘導(dǎo) 培養(yǎng)基中 慶科 分泌漆酶的能力最強(qiáng) 達(dá) 不同誘導(dǎo)培養(yǎng)基對(duì)漆酶活力的影響 由表 圖 可知 連續(xù) 測(cè)試中 種香菇 菌株液體產(chǎn)漆酶活力在不同培養(yǎng)基上均有不同表 現(xiàn) 且 種誘導(dǎo)培養(yǎng)基對(duì)漆酶活力均具有極顯著的 影響 菌株馬桑香菇 香菇 和慶科 在 種不 同誘導(dǎo)培養(yǎng)基發(fā)酵產(chǎn)漆酶活力均隨培養(yǎng)時(shí)間呈現(xiàn) 先增后降的趨勢(shì) 達(dá)到峰值的時(shí)間有所差異 但主 要集中在培養(yǎng) 馬桑香菇在 種不同誘導(dǎo) 培養(yǎng)基上連續(xù)培養(yǎng) 時(shí) 在含米糠的誘導(dǎo)培養(yǎng)基 中分泌漆酶的能力最強(qiáng) 漆酶活力達(dá) 其次為 培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基 分別達(dá)到 而在含棉籽殼 的誘導(dǎo)培養(yǎng)基 中酶活僅為 香菇 在連續(xù)培養(yǎng) 時(shí) 在含玉米芯的誘導(dǎo)培養(yǎng) 基 上分泌漆酶的能力明顯強(qiáng)于其他培 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 年第 卷第 期 養(yǎng)基 且出現(xiàn)峰值 酶活達(dá) 同時(shí)在該天出 現(xiàn)酶活峰值的還有 培養(yǎng)基 酶活 分別為 而在僅含堿性木質(zhì)素的 培養(yǎng)基 中 香菇 產(chǎn)漆酶的能力最低 僅為 且該種培養(yǎng)基下 整個(gè)培養(yǎng)期日平 均酶活力最高不超過(guò) 因此 玉米芯對(duì) 香菇 分泌漆酶的誘導(dǎo)能力明顯強(qiáng)于麥麩 米糠 棉籽殼和堿性木質(zhì)素 而對(duì)于慶科 在培養(yǎng)初 期 培養(yǎng) 含麥麩的誘導(dǎo)培養(yǎng)基 中 檢測(cè)到的漆酶活力最強(qiáng) 達(dá) 含棉籽殼的 誘導(dǎo)培養(yǎng)基 在培養(yǎng) 才檢測(cè)到微弱 的漆酶活力 僅為 酶活力最弱的是僅含 堿性木質(zhì)素的誘導(dǎo)培養(yǎng)基 一直到培養(yǎng) 方才檢測(cè)出較低的漆酶活力 僅為 而 在培養(yǎng) 時(shí) 誘導(dǎo)培養(yǎng)基依舊保持最高的 漆酶活力 達(dá) 其次為 誘導(dǎo)培 養(yǎng)基 種不同誘導(dǎo)培養(yǎng)基的漆酶活力趨勢(shì)大致表 現(xiàn)為 因此 慶科 在含麥麩的誘導(dǎo)培 養(yǎng)基中分泌漆酶的能力是最強(qiáng)的 討 論 與 結(jié) 論 漆酶作為主要的木質(zhì)素降解酶 參與香菇生長(zhǎng) 發(fā)育的每一個(gè)階段 本試驗(yàn)以南方香菇產(chǎn)業(yè) 主栽品種香菇 慶科 以及貴州省特有香菇 馬桑香菇為研究對(duì)象 研究香菇菌株間的區(qū)別性差 異 并利用堿性木質(zhì)素 純品 及 種食用菌栽培中 常用的基質(zhì)培養(yǎng)料為誘導(dǎo)物 研究 種不同香菇菌 株液體發(fā)酵產(chǎn)漆酶活力 研究結(jié)果表明 馬桑香 菇 香菇 和慶科 雖均同為有機(jī)香菇的下屬 分支 但菌株間是有區(qū)別的 馬桑香菇同香菇 和 慶科 間的親緣性也較遠(yuǎn) 且兩兩間均有拮抗反 應(yīng) 種菌株菌絲生長(zhǎng)對(duì)適宜溫度的選擇也有較小 差異 是存在一定種源差異的 此外 香菇液體產(chǎn) 漆酶活力受菌株遺傳差異和 種不同誘導(dǎo)培養(yǎng)基的 影響均為極顯著 但各處理漆酶整體變 化規(guī)律均呈現(xiàn)先升后降的趨勢(shì) 說(shuō)明菌株和培養(yǎng) 基的差異僅對(duì)漆酶活性大小有影響 但不影響漆酶 的變化規(guī)律 本結(jié)果同 等對(duì)香菇的研究結(jié) 果 相似 且在韓美玲等對(duì)糙皮側(cè)耳的研究中也有 類(lèi)似趨勢(shì)存在 此外 本試驗(yàn)培養(yǎng)前期 種香 菇菌株不同處理下產(chǎn)漆酶活力均較低 慶科 菌 株部分處理下甚至無(wú)法檢測(cè)出漆酶活力 而在培養(yǎng) 中后期漆酶活力較為旺盛 峰值也主要集中在培養(yǎng) 內(nèi) 表明香菇對(duì)木質(zhì)素降解吸收時(shí)間普遍 較晚 張權(quán)等研究發(fā)現(xiàn) 香菇生長(zhǎng)過(guò)程中對(duì)營(yíng)養(yǎng)的 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 年第 卷第 期 利用存在一定的先后順序 在香菇液體發(fā)酵培養(yǎng)中 發(fā)現(xiàn)淀粉優(yōu)于纖維素和木質(zhì)素被利用 楊舒 貽等指出 香菇 液體培養(yǎng)中碳源淀粉較木質(zhì)素 更早被降解利用 且淀粉酶的最高活性出現(xiàn)在培養(yǎng) 漆酶活力出現(xiàn)在培養(yǎng) 本研究漆酶活 力變化規(guī)律與之吻合 此外 種誘導(dǎo)物中 除堿性木質(zhì)素 純品 外 其他 種較為復(fù)雜的木質(zhì)纖維素基質(zhì)均為常見(jiàn)食用 菌栽培輔料 也是農(nóng)林生產(chǎn)中常見(jiàn)的二次資源 在 眾多研究中 麥麩一致被認(rèn)為是有利于漆酶分泌的 基質(zhì) 本研究同樣發(fā)現(xiàn)基質(zhì)麥麩對(duì)香菇表現(xiàn) 出較強(qiáng)的產(chǎn)漆酶誘導(dǎo)力 它能促使馬桑香菇 慶科 產(chǎn)酶時(shí)間提前 酶活峰值分別于 馬桑香菇 慶科 出現(xiàn) 并且在麥麩誘導(dǎo)下慶科 產(chǎn)酶能力最高 其次為 基質(zhì)玉米芯 麥麩誘導(dǎo)馬桑香菇和香菇 的產(chǎn)酶 能力分別僅次于米糠和玉米芯 表明輔料麥麩對(duì)慶 科 馬桑香菇和香菇 均有較強(qiáng)的漆酶誘導(dǎo) 力 此外 玉米芯也表現(xiàn)出較高的產(chǎn)漆酶誘導(dǎo)力 香菇 在含玉米芯的誘導(dǎo)培養(yǎng)基下產(chǎn)漆酶能力最 強(qiáng) 最高能達(dá)到 玉米芯誘導(dǎo)慶科 產(chǎn)漆酶的能力僅次于麥麩 最高達(dá) 玉 米芯對(duì)馬桑香菇產(chǎn)漆酶的誘導(dǎo)能力相對(duì)米糠和麥 麩較低 最高時(shí)能達(dá) 表明麥麩和玉米 芯對(duì)香菇 和慶科 均具有較強(qiáng)的產(chǎn)漆酶誘 導(dǎo)力 而馬桑香菇產(chǎn)漆酶活力受米糠和麥麩影響更 大 這樣的選擇性差異可能是由于 種菌株遺傳差 異以及胞外蛋白質(zhì)含量變化造成的 通過(guò)漆酶活 性的對(duì)比研究 可初步得出香菇 慶科 和馬 桑香菇最佳輔料分別為玉米芯 麥麩和米糠 且 種 菌株共同的最佳輔料為麥麩 馬桑香菇在實(shí)現(xiàn)生 產(chǎn)以來(lái) 菌棒配方均有別于香菇 和慶科 但 生產(chǎn)中利用含米糠 麥麩和玉米芯的香菇栽培種配 方生產(chǎn)馬桑香菇在理論上是可行的 但更為具體的 反應(yīng)機(jī)制和降解過(guò)程還需結(jié)合其他幾種胞外酶進(jìn) 行綜合分析 而且能否保證馬桑香菇的口感和豐富 營(yíng)養(yǎng)成分還需進(jìn)一步研究 參 考 文 獻(xiàn) 陳小敏 吳海冰 向泉桔 等 不同溫度培養(yǎng)對(duì)香菇漆酶活性及轉(zhuǎn) 錄表達(dá)的影響 四川大學(xué)學(xué)報(bào) 自然科學(xué)版 賈素巧 碳氮營(yíng)養(yǎng)對(duì)猴頭菌生長(zhǎng)發(fā)育及胞外酶活性的影響 保定 河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 嚴(yán)培蘭 高君輝 黑木耳的抗霉能力 產(chǎn)量性狀與不同胞外酶活 的相關(guān)性 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) 增刊 任鵬飛 任海霞 曲 玲 等 香菇胞外酶活性變化及其與農(nóng)藝性 狀的相關(guān)性分析 山東農(nóng)業(yè)科學(xué) 孫淑靜 郭艷艷 吳曉華 等 不同食用菌品種產(chǎn)漆酶規(guī)律的研 究 中國(guó)食用菌 唐 菊 段傳人 黃友瑩 等 白腐菌木質(zhì)素降解酶及其在木質(zhì) 素降解過(guò)程中的相互作用 生物技術(shù)通報(bào) 韓美玲 安 琪 吳雪君 等 不同木質(zhì)纖維素誘導(dǎo)對(duì)糙皮側(cè)耳 液體發(fā)酵產(chǎn)漆酶活性的影響 菌物學(xué)報(bào) 張 權(quán) 香菇胞外酶活性變化規(guī)律和農(nóng)藝性狀研究 新鄉(xiāng) 河南科技學(xué)院 李良敏 基于漆酶活性測(cè)量的香菇育種早期篩選技術(shù)研究 上海 上海海洋大學(xué) a 安 琪 吳雪君 吳 冰 等 不同碳源和氮源對(duì)金針菇降解木 質(zhì)纖維素酶活性的影響 菌物學(xué)報(bào) 王偉科 陸 娜 周祖法 等 種胞外酶在香菇不同生長(zhǎng)階段 的活性變化 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué) 楊舒貽 楊 暉 閭瓊妮 等 香菇液體培養(yǎng)過(guò)程中 種胞外酶 酶活的變化 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 王宜磊 碳源和氮源對(duì)彩絨革蓋菌 木質(zhì)纖維素 酶和木質(zhì)素酶分泌的影響 微生物學(xué)雜志 趙林果 陸 葉 謝惠芳 等 碳源和氮源對(duì)彩絨革蓋菌液體發(fā) 酵合成漆酶的影響 微生物學(xué)雜志 尚 潔 吳秋霞 練小龍 等 碳源和氮源對(duì)木蹄層孔菌產(chǎn)漆酶 的影響及酶學(xué)性質(zhì)研究 中國(guó)生物工程雜志 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 年第 卷第 期