辣椒枯萎病主要致病菌的分離鑒定及農(nóng)用拮抗菌篩選.pdf

辣 椒 枯 萎 病 主 要 致 病 菌 的 分 離 鑒 定 及 農(nóng) 用 拮 抗 菌 篩 選 張 俊 慶 1 鄭 安 科 1 高 立 紅 1 孫 亞 敏 1 姜 志 陽(yáng) 2 1 山 東 土 木 啟 研 發(fā) 中 心 山 東 濟(jì) 寧272507 2 中 科 院 沈 陽(yáng) 生 態(tài) 應(yīng) 用 研 究 所 遼 寧 沈 陽(yáng)11 001 6 摘要 目的 分 離 鑒定辣椒枯萎病主要致病 菌 探尋能 夠有 效 抑 制 該 致 病 菌 的 生 防 菌 株 方 法 采 用 植 物 病 害 組 織 致 病 菌 劃 線 分 離 方法分離 致病菌 經(jīng) 形 態(tài) 學(xué) 以及ITS 區(qū)域PCR 檢測(cè) 確定菌 株 屬性 通過(guò)平 板拮 抗篩 選 確 定對(duì)該 致病 菌具 有拮 抗作 用的 農(nóng)用 生防 菌 株 結(jié)果 初步鑒定該 致病菌為尖孢鐮刀 Fusariumoxysporum 將該致 病 菌與1 1 株 農(nóng)用 微生物 芽 孢 桿 菌 和3 株 農(nóng) 用 微 生 物 木 霉 菌 進(jìn) 行 拮 抗試驗(yàn) 發(fā)現(xiàn)枯草 芽 孢 桿 菌 Bacillussubtilis 蘇云金 芽 孢 桿 菌 Bacillusthuringiensis 解 淀 粉 芽 孢 桿 菌 Bacillusamyloliquefaciens 海 洋 芽 孢桿菌 Bacillusmarinus 堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌 Bacillusfirmus 甲基營(yíng) 養(yǎng) 型芽孢 桿菌 Bacillusmethylotrophicus 6 株 芽 孢 桿 菌 對(duì) 該 致 病 菌 拮 抗效果明 顯 長(zhǎng)枝 木 霉 Trichodermalongibrachiatum 與 哈 茨 木 霉 Trichodermaharzianum 2 株 木 霉 菌 對(duì) 該 致 病 菌 具 有 明 顯 的 拮 抗 效 果 結(jié)論 篩選到了8 株 能 夠 有 效 抑制該病原菌的生防菌 株 為 以后 研究生 防 肥料奠 定了 基礎(chǔ) 關(guān)鍵詞 枯萎病 分 離 鑒定 拮抗菌 篩選 中圖分類(lèi) 號(hào) S436 41 8 1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 051 7 661 1 2021 08 01 34 04 doi 1 0 3969 j issn 051 7 661 1 2021 08 035 開(kāi) 放科學(xué) 資源 服務(wù) 標(biāo)識(shí) 碼 OSID IsolationandIdentificationoftheMainPathogensCausingCapsicumWiltandScreeningofAgriculturalAntagonisms ZHANGJun qing ZHENGAn ke GAOLi hongetal ShandongElephantResearchandDevelopmentCenter Jining Shandong272507 Abstract Objective Toisolateandidentifythemainpathogenicbacteriaofpepperfusariumwilt andtosearchforbiocontrolstrainsthat caneffectivelyinhibitthepathogenicbacteria Method Thepathogenicbacteriawereseparatedbystreakingandisolationofpathogenicbac teriafromplantdiseasetissues andthemorphologyandPCRdetectionofITSareawereusedtodeterminetheattributesofthestrains Through plateantagonisticscreening theagriculturalbiocontrolstrainswithantagonisticeffectsonthepathogenswasdetermined Result Thepatho genicbacteriawaspreliminarilyidentifiedasFusariumoxysporum Thepathogenicbacteriawasscreenedwith1 1strainsofagriculturalmicroor ganismsBacillusand3strainsofagriculturalmicroorganismsTrichodermainantagonisticexperiments ItwasfoundthatthesixstrainsofBacil lusincludingBacillussubtilis Bacillusthuringiensis Bacillusamyloliquefaciens Bacillusmarinus Bacillusfirmus Bacillusmethylotrophicus hadobviousantagonisticeffectonthepathogenicbacteria andtwostrainsofTrichodermaincludingTrichodermalongibrachiatumandTri chodermaharzianumhadobviousantagonisticeffectsonthepathogenicbacteria Conclusion Throughthisresearch 8biocontrolstrainsthat caneffectivelyinhibitthepathogenwerescreened whichpavesthewayforstudyingbiocontrolfertilizers Keywords Fusariumwilt Isolation Identification Antagonisticantibacterial Screening 作 者 簡(jiǎn) 介 張 俊 慶 1 991 男 甘 肅 武 威 人 碩 士 從 事 植 物 生 防 菌 的 應(yīng) 用 研 究 收 稿 日 期 2020 08 1 3 枯萎病 作為一 種 常 見(jiàn) 的 植 物 病 害 已 成 為 制 約 經(jīng) 濟(jì) 作 物 發(fā) 展 的一大 主要病 害 特別是 對(duì)黃瓜 1 番 茄 2 茄 子 3 4 香 蕉 5 以及款 冬花 6 等造 成 了 巨 大 經(jīng)濟(jì) 損失 這 些 年 隨 產(chǎn) 業(yè) 化 集 中 辣 椒 等 蔬 菜 復(fù) 種 指 數(shù) 的 提 高 枯 萎 病 的 發(fā) 生 呈 逐 年 增 長(zhǎng) 趨 勢(shì) 嚴(yán) 重 影 響 了 我 國(guó) 辣 椒 質(zhì) 量 以 及 農(nóng) 戶 的 收 入 辣 椒 枯 萎 病 的發(fā)生 率一般 為1 5 30 嚴(yán) 重 時(shí) 達(dá)70 80 成 為 辣 椒 的一個(gè) 重要病 害 7 研 究 表 明 辣 椒 枯 萎 病 主 要 為 鐮 刀 菌 所 致 黃 立 志 等 8 黃 素 芳 等 9 梁 建 根 等 1 0 研 究 表 明 廣 西 玉 林 福 建 漳 州 山 西 等 辣 椒 枯 萎 病 均 由 尖 孢 鐮 刀 菌 所 致 目 前 防治主 要以化 學(xué)手段 為 主 高殘 留 耐 藥 性 等 嚴(yán) 重 影 響 蔬 菜 品 質(zhì) 1 1 引起 環(huán) 境 污 染 和 農(nóng) 藥 殘 留 1 2 筆 者 從 病 原 菌 出 發(fā) 分 離 病 原 菌 探 索 對(duì) 該 病 原 菌 具 有 拮 抗 作 用 的 有 益 微 生 物 尋 找 對(duì) 應(yīng) 的 生 物 防 治 手 段 從 生 物 學(xué) 角 度 提 高 辣 椒 品 質(zhì) 減 少 損失 1 材料 與方 法 1 1 材 料 供 試材 料 取 自 安 徽 省 蚌 埠市 五 河縣蔬 菜基地 該 基 地 蔬 菜 種 類(lèi) 豐 富 種 植 密 度 大 復(fù) 耕 率 高 辣 椒 枯 萎 問(wèn) 題 較 為 嚴(yán) 重 在 辣 椒 成 株 期 間 選 取 發(fā) 病 比 較 嚴(yán) 重 的 地 塊 摘 取 樣 本 基因組 提取試 劑盒購(gòu) 自 上 海 生 物工 程 有 限 公 司 孟 加 拉 紅 培 養(yǎng) 基 購(gòu) 自 北 京 奧 博 星 生 物 科 技 有 限 責(zé) 任 公 司 其 成 分 蛋 白 胨5 0g L 硫 酸 鎂0 5g L 磷 酸 二 氫 鉀1 0g L 葡 萄 糖 1 0g L 氯 霉素0 1g L 孟 加 拉 紅0 033g L 瓊 脂20g L 馬 鈴 薯 瓊 脂 糖 培 養(yǎng) 基 PDA 馬 鈴 薯 去 皮 200 0g 葡 萄 糖 20 0g 蒸 餾 水1000mL 煮 沸 后 保 持20min 并 用4 層 紗 布 過(guò) 濾 殘 渣 加 入 瓊 脂 粉1 5g L pH 自 然 DNA 擴(kuò) 增 試 劑 盒 購(gòu) 自 上 海生 物 工程 有 限 公 司 涉 及 到 的 芽 孢 桿 菌 枯 草 芽 孢 桿 菌 Bacillussubtilis 海 洋 芽 孢 桿 菌 Bacillusmarinus 甲 基 營(yíng) 養(yǎng) 型芽 孢 桿菌 Bacillusmethylotrophicus 蘇 云 金 芽 孢 桿 菌 Bacillusthuringiensis 堅(jiān)強(qiáng) 芽 孢 桿 菌 Bacillusfirmus 解 淀 粉 芽 孢桿 菌 Bacillusamyloliquefaciens 地 衣 芽 孢 桿 菌 Ba cilluslicheniformis 巨 大 芽 孢 桿 菌 Bacillusmegaterium 膠 凍 樣 芽孢 桿 菌 Bacillusmucilaginosus 高 地 芽 孢 桿 菌 Bacil lusaltitudinis 多黏芽 孢桿菌 Bacilluspolymyxa 由 山 東 土 木 啟 生 物 科 技 有 限 公 司 研 發(fā) 中 心 保 存 生 防 真 菌 綠 色 木 霉 Trichodermaviride 哈 茨 木霉 Trichodermaharzianum 長(zhǎng) 枝 木 霉 Trichodermalongibrachiatum 由 沈 陽(yáng) 應(yīng) 用 生 態(tài) 研 究 所 提 供 1 2 病 原菌 的 分離 純 化 選取發(fā) 病植株 的病根 莖 部作為 分 離 標(biāo) 本 分別 用 無(wú)菌 水 沖洗 干 凈 并 將 組 織 切 小 塊 在70 乙 醇 中浸 泡30s 然后放 入0 1 的 升汞 中 浸泡5min 撈出后 用 無(wú) 菌 水沖 洗1 0 次 以 上 在 無(wú) 菌 條 件 下 接 種 于PDA 平 板 上 接 種 時(shí)使 得 維管 束 一 面 與 培 養(yǎng) 基 正 面 接 觸 在28 培 養(yǎng) 箱 安 徽 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) J AnhuiAgric Sci 2021 49 8 1 34 1 37 中 培 養(yǎng)3 5d 將長(zhǎng) 出菌 落 切 取 邊 緣 部 分 重 新 接 種 到 新 的 孟 加 拉 紅 平 板 上 培 養(yǎng) 直 到 分 離 出 單 一 形 態(tài) 的 菌 種 并 將 不 同 組 織 的分離 菌落分 別保存 于4 冰箱 待用 6 將分離 到的病 原菌接 種 到PDA 液體培養(yǎng) 基中 在28 1 80r min 的 條件 下 培 養(yǎng) 分 別 以 灌 根 和 傷 口 接 種 形 式 接 種 到 健 康植株 上以確 認(rèn)主要 致 病菌 并在 孟 加拉 紅 PDA 培 養(yǎng) 基 上 分別觀 察菌落 形 態(tài) 及 菌 絲 孢 囊 形 態(tài) 根 據(jù)Booth 1 3 的 方 法 進(jìn) 行初步 鑒定 1 3 分 子 生 物 學(xué) 鑒 定 真 菌 基 因 組 提 取 采 用CTAB 法 1 4 通 過(guò)PCR 擴(kuò) 增菌 株 的ITS 區(qū) 域 測(cè) 序 后 進(jìn) 行 基 因 對(duì) 比 鑒 定 引 物F TCCGTAGGTGAACCTGCGG 引 物R TCCTCCGCT TATTGATAT 擴(kuò)增程 序 94 預(yù) 變性1min 55 退 火1min 72 延 伸2min 共30 循環(huán) 最后72 延伸1 0min 擴(kuò) 增完成 以 后通 過(guò)1 核酸 凝 膠電 泳 檢 測(cè) 并 送 北 京 擎 科 生 物 測(cè) 序 將 測(cè) 序 序 列 在NCBI 中通 過(guò)BLAST 對(duì) 比 確 定致 病 菌種 類(lèi) 1 4 農(nóng) 用 拮抗 菌篩 選 將 主 要 致 病 菌在PDA 液 體培 養(yǎng) 基 中 28 1 80r min 條件下 培 養(yǎng)3 5d 形成 均 勻的懸 浮菌液 吸 取1 00 L 菌 懸液 均 勻 涂 布 到PDA 平 板上 封口在30 培養(yǎng) 箱 培養(yǎng)5 7d 選 取 長(zhǎng)勢(shì) 良 好的 部 位 鏟取0 5m 2 大 小 的3 塊 致 病 菌 均勻 接 種于 馬 鈴薯 培 養(yǎng)基 上 培養(yǎng)2 3d 取 出后在 培 養(yǎng) 基 中心 接 種芽 孢 桿菌 或 者生 防 真菌 30 培 養(yǎng)3 5d 觀 察 拮 抗 情況 并 記錄 抑 菌效 果 2 結(jié) 果與分 析 2 1 病原 菌 分離 與 純化 通 過(guò) 對(duì) 根 部 和 莖 基 部 病 害 區(qū) 域 的 分 離 共 獲得3 株純 化 菌株 在PDA 斜 面 培 養(yǎng) 基 上 保 存 將 分 離 得到 的 純化 菌 落 同 時(shí) 以6 1 0 6 個(gè) 孢 子 數(shù) 澆 灌 和 莖 基 部 切 傷 處涂 抹 的方 式 接種 到 室內(nèi) 盆 栽 培 養(yǎng) 的 辣 椒 無(wú) 菌 苗 上 發(fā) 現(xiàn) 只 有1 號(hào) 致 病 呈 萎 蔫 癥 狀 較 明 顯 在 幼 苗 根 部 出 現(xiàn) 病 斑 初 為 淺 黃 褐 色 后 呈 褐 色 最 后 變 成 黑 色 病 株 地 上 部 出 現(xiàn) 萎 蔫 最 后 葉片 發(fā) 黃 枯 死 與 田 間 辣 椒 枯 萎 病 表 現(xiàn) 癥 狀 相 同 初 步 確定1 號(hào)為 主 要致 病 菌 2 2 病 原菌 形 態(tài) 將1 號(hào) 菌 株 接 種 于PDA 培 養(yǎng) 基 上 菌 絲 為 白 色 菌 落 邊 緣 呈 紅 色 羊 毛 狀 至 氈 狀 菌 落 背 面 為 紫 紅 色 大 型 分生 孢 子 形 態(tài) 為 鐮 刀 形 稍 微 彎 曲 兩 端 尖 無(wú) 色 大 部 分 單 生無(wú) 分 割 個(gè) 別 有1 3 個(gè) 分 隔 孢 子 大 小 為 67 5 1 64 7 m 364 7 81 1 7 m 圖1 初 步 確 定 為 尖 孢 鐮 刀 菌 圖1 致病鐮刀 菌 鏡檢結(jié)果 Fig 1 Microscopicexaminationofpathogenic F u s a r i u m 2 3 分 子 生 物 學(xué) 鑒 定 結(jié) 果 通 過(guò) 引 物 對(duì)ITS 區(qū) 域 進(jìn) 行PCR 擴(kuò) 增 發(fā) 現(xiàn) 在530bp 處 存 在1 條 清 晰的條 帶 圖2 經(jīng)測(cè) 序后 通 過(guò) 基 因 數(shù) 據(jù) 庫(kù) 對(duì) 比 發(fā) 現(xiàn) 其 與 尖 孢 鐮 孢 Fusariumoxysporum 的 相 似 度 為99 進(jìn) 一 步 佐 證 了 形 態(tài) 學(xué) 鑒 定 結(jié) 果 是 正 確 的 2 4 農(nóng) 用 拮 抗 微 生 物 的 篩 選 共 驗(yàn) 證 了1 4 種 常 用 生 防 菌 與 該 病 原 菌 的 拮 抗 性 其 中 芽 孢 桿 菌1 1 株 有 拮 抗 效 果 的8 株 其 中 效 果 明 顯 的 有6 株 分 別 為 枯 草 芽 孢 桿 菌 蘇 云 金 芽 孢 桿 菌 解 淀 粉 芽 孢 桿 菌 海 洋 芽 孢 桿 菌 堅(jiān) 強(qiáng) 芽 孢 桿 菌 抑 制 效 果 一 般 的 有2 株 分 別 為 膠 凍 樣 芽 孢 桿 菌 多 黏 芽 孢 桿 菌 無(wú) 抑 菌 效 果 的 有3 株 分 別 為 地 衣 芽 孢 桿 菌 巨 大 芽 孢 桿 菌 高 地 芽 孢 桿 菌 圖3 表1 木 霉 菌3 株 3 株 都 存 在 抑 菌 效 果 其 中 哈 茨 木 霉 抑 菌 效 果 最 好 長(zhǎng) 枝 木 霉 次 之 綠 色 木 霉 只 有 競(jìng) 爭(zhēng) 性 抑 制 效 果 不 明 顯 圖4 表1 3 結(jié)論 與討 論 通過(guò)分 離鑒定 發(fā) 現(xiàn) 引 起 辣 椒 枯 萎 病 的 病 原 菌 主 要 為 尖 圖2 PCR 擴(kuò)增ITS 區(qū)域核 酸凝膠電泳圖 譜 Fig 2 PCRamplifiedITSregionnucleicacidgelelectrophoresis 孢 鐮 刀 菌 并 對(duì) 該 致 病 菌 進(jìn) 行 了 初 步 拮 抗 試 驗(yàn) 篩 選 發(fā) 現(xiàn) 哈 茨 木 霉 菌 和 枯 草 芽 孢 桿 菌 蘇 云 金 芽 孢 桿 菌 解 淀 粉 芽 孢 桿 菌 海 洋 芽 孢 桿 菌 堅(jiān) 強(qiáng) 芽 孢 桿 菌 都 對(duì) 該 株 尖 孢 鐮 刀 菌 具 有 5 3 1 49 卷8 期 張 俊 慶 等 辣 椒 枯 萎 病 主 要 致 病 菌 的 分 離 鑒 定 及 農(nóng) 用 拮 抗 菌 篩 選 圖3 芽孢桿菌拮 抗 致病鐮刀 菌 Fig 3 B a c i l l u santagonizes F u s a r i u m 較 好 的抑制 作用 其中哈 茨 木 霉 效 果 最 佳 與 此 前 研 究 發(fā) 現(xiàn) 哈 茨 木 霉 能 夠 有 效 抑 制 番 茄 黃 瓜 西 瓜 枯 萎 病 的 結(jié) 果 相 似 1 5 1 6 曹 君等 1 7 研 究 發(fā) 現(xiàn) 枯 草 芽 孢 桿 菌 和 哈 茨 木 霉 搭 配 后 共 同作用 對(duì)棉花 枯萎病 有 較 強(qiáng) 的 抑 制 作 用 充 分 證 實(shí) 芽 孢 桿 菌 木 霉 菌 能 夠 有 效 抑 制 植 物 病 害 的 發(fā) 生 在 現(xiàn) 有 的 發(fā) 酵 基 礎(chǔ) 上有效 地將芽 孢桿菌 和 木 霉 菌 進(jìn) 行 復(fù) 配 使 其 在 作 物 根 系 周 邊 建 立 有 效 的 防 御 群 體 阻 斷 尖 孢 鐮 刀 菌 的 侵 染 同 時(shí) 還 能夠 對(duì) 作物 生 長(zhǎng)起 到 一定 的 促進(jìn) 作 用 1 8 20 該結(jié) 果 將 減 少 化 學(xué) 農(nóng) 藥 的 使 用 實(shí) 現(xiàn) 一 個(gè) 點(diǎn) 對(duì) 點(diǎn) 的 生 物 防 治 為 以 后 生 物 肥 料 生 物 農(nóng) 藥 的 開(kāi) 發(fā) 提 供 科 學(xué) 依 據(jù) 同 時(shí) 利 用 微 生 物 菌 來(lái) 防 治 植物 病 蟲(chóng) 害 具 有 高 效 經(jīng) 濟(jì) 無(wú) 副 作 用 等 優(yōu) 點(diǎn) 另 一 方 面 該 研究 中 篩選 出 的 致 病 菌 又 可 以 作 為 靶 向 病 原 菌 用 于 篩 選 土 壤有 益 微生 物 進(jìn) 一步 完 善農(nóng) 用 微生 物 體系 6 3 1 安徽農(nóng)業(yè) 科學(xué) 2021 年 圖4 木霉 菌拮抗致病 鐮刀菌 Fig 4 T r i c h o d e r m aantagonizes F u s a r i u m 表1 農(nóng)用 生防拮抗菌 篩 選 Table1 Screeningofagriculturalbiocontrolantagonists 類(lèi)型 Type 拮抗菌 Antagonistic bacteria 抑 菌情 況 Antibacterial situation 細(xì)菌 枯草芽孢桿 菌Bacillussubtilis Bacteria 海洋芽孢桿 菌Bacillusmarinus 甲基營(yíng)養(yǎng)型 芽孢桿菌Bacillusmethylotrophicus 蘇云金芽孢 桿菌Bacillusthuringiensis 堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿 菌Bacillusfirmus 解淀粉芽孢 桿菌Bacillusamyloliquefaciens 地衣芽孢桿 菌Bacilluslicheniformis 巨大芽孢桿 菌Bacillusmegaterium 膠凍樣芽孢 桿菌Bacillusmucilaginosus 高地芽孢桿 菌Bacillusaltitudinis 多黏芽孢桿 菌Bacilluspolymyxa 真菌 綠色木霉Trichodermaviride Fungi 哈茨木霉Trichodermaharzianum 長(zhǎng)枝木霉Trichodermalongibrachiatum 注 抑菌 性強(qiáng) 抑菌性一般 競(jìng)爭(zhēng)性抑 制 不抑菌 Note Strongantibacterial effect General antibacterial effect Competitiveinhibition Noantibacterialeffect 參 考 文 獻(xiàn) 1 吳 鳳 芝 孟 立 君 文 景 芝 黃 瓜 根 系 分 泌 物 對(duì) 枯 萎 病 菌 菌 絲 生 長(zhǎng) 的 影 響 J 中 國(guó) 蔬 菜 2002 5 26 27 2 莫 賤 友 番 茄 枯 萎 病 和 青 枯 病 的 診 斷 與 防 治 技 術(shù) J 長(zhǎng) 江 蔬 菜 2004 5 28 29 3 張 燕 燕 柏 廣 利 孫 雪 花 茄 子 枯 萎 病 的 發(fā) 生 與 綜 合 防 治 J 現(xiàn) 代 農(nóng) 業(yè) 科 技 201 1 1 0 1 74 1 79 4 吳 健 劉 才 宇 汪 德 尚 等 K3 K5 抑 菌 劑 對(duì) 紫 長(zhǎng) 茄 細(xì) 菌 性 枯 萎 病 的 防 治 效 果 J 安 徽 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 201 4 42 1 71 72 84 5 彭 埃 天 宋 曉 兵 凌 金 鋒 等 4 香 蕉 枯 萎 病 菌4 號(hào) 生 理 小 種 分 子 檢 測(cè)與 枯 萎 病 生 物 防 治 研 究 進(jìn) 展 J 果 樹(shù) 學(xué) 報(bào) 2009 26 1 77 81 6 劉 會(huì) 清 張 愛(ài) 香 馬 海蓮 等 款冬 花枯萎病的 病原分離 鑒 定 J 河 南 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 201 0 39 1 1 73 75 7 郝 曉 娟 賀 運(yùn) 春 辣 椒 枯 萎 病 的 防 治 J 北 方 園 藝 2003 5 61 8 黃 立 志 戚 佩 坤 玉 林地 區(qū)辣椒枯萎 病的病原菌鑒 定 J 廣西農(nóng)業(yè) 大 學(xué) 學(xué) 報(bào) 1 994 1 3 4 348 352 9 黃 素 芳 朱 育 菁 肖 榮 鳳 等 辣 椒枯萎病原 菌分離鑒定 及其在植 株 體 內(nèi) 的 分 布 J 廈 門(mén) 大 學(xué) 學(xué) 報(bào) 自 然 科 學(xué) 版 2004 43 S1 71 73 1 0 梁 建 根 王 建 明 辣 椒 枯 萎 病 病 原 的 初 步 研 究 J 山 西 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 學(xué) 報(bào) 自 然 科 學(xué) 版 2002 22 1 29 31 45 1 1 PAULITZTC B LANGERRR Biologicalcontrolingreenhousesystems J Annualreviewofphytopathology 2001 39 1 1 03 1 33 1 2 COOKRJ BRUCKARTWL COULSONJR etal Safetyofmicroorgan ismsintendedforpestandplantdiseasecontrol Aframeworkforscientific evaluation J Biologicalcontrol 1 996 7 3 333 351 1 3 BOOTHC 鐮 刀 菌 屬 M 陳 其 煥 譯 北 京 農(nóng) 業(yè) 出 版 社 1 988 1 92 1 93 1 4 吳 發(fā) 紅 黃 東 益 黃 小 龍 等 幾 種 真 菌DNA 提 取 方 法 的 比 較 J 中 國(guó) 農(nóng) 學(xué) 通 報(bào) 2009 25 8 62 64 1 5 姚 彬 王 傲 雪 李 景 富 哈 茨 木 霉 對(duì)4 種 番 茄 病 原 真 菌 抑 制 作 用 的 研 究 J 東 北 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 學(xué) 報(bào) 2009 40 5 26 31 1 6 蒲 金 基 曾 會(huì) 才 綠 色 木 霉LTR1 2 1 對(duì) 黃 瓜 枯 萎 病 菌 防 治 作 用 機(jī) 制 的 初 步 研 究 J 熱 帶 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2002 22 4 22 25 1 7 曹 君 高 智 謀 潘 月 敏 等 枯草芽孢 桿菌BS 菌株和哈 茨木 霉TH 1 菌 株 對(duì) 棉 花 枯 黃 萎 病 菌 的 拮 抗 作 用 J 植物 病理 學(xué)報(bào) 2005 35 S1 1 70 1 72 1 8 曹 明 慧 冉 煒 楊 興 明 等 煙 草 黑 脛 病 拮 抗 菌 的 篩 選 及 其 生 物 效應(yīng) J 土 壤 學(xué) 報(bào) 201 1 48 1 1 51 1 59 1 9 楊 合 同 唐 文 華 RYDERM 木 霉 菌 與植物病害的 生物防治 J 山 東科 學(xué) 1 999 1 2 4 7 1 5 20 20 張 霞 唐 文 華 張 力 群 枯 草 芽 孢 桿 菌B931 防 治 植 物 病 害 和 促 進(jìn) 植 物 生 長(zhǎng) 的 作 用 J 作 物 學(xué) 報(bào) 2007 33 2 236 241 上 接 第1 33 頁(yè) 1 1 王 偉 李 術(shù) 娜 李 紅 亞 等 大麗輪枝 菌 拮抗細(xì)菌菌 株1 2 51 的篩選鑒 定 與 抗 菌 物 性 質(zhì) 分 析 J 中 國(guó) 農(nóng) 學(xué) 通 報(bào) 2009 25 1 9 1 4 1 9 1 2 索 雅 麗 李 術(shù) 娜 李 紅 亞 等 番茄灰 霉病菌頡頏 菌株的篩選 及功能基 因 的 分 析 J 中 國(guó) 植 保 導(dǎo) 刊 201 0 30 8 7 1 0 1 3 杜 淑 濤 李 術(shù) 娜 朱 寶成 白菜黑斑 病 拮抗細(xì)菌BacillusvelezensisDL 59 的 篩 選 鑒 定 及 田 間 防 效 實(shí) 驗(yàn) J 河 北 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué) 學(xué) 報(bào) 201 0 33 6 51 56 1 4 吳 英 俊 林 寶 英 梅 雙 雙 等 香 蕉 枯 萎 病 拮 抗 菌 株BS1 1 抗 真 菌 活 性 物 質(zhì) 的 研 究 J 安 徽 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 201 4 42 35 1 2505 1 2507 1 251 5 1 5 崔 文 會(huì) 炊 春 萌 孫 雪 等 貝 萊斯芽孢桿 菌對(duì)果蔬土傳 病害 的 抑 菌 效 果 研 究 J 工 業(yè) 微 生 物 2020 50 5 1 5 20 1 6 MENGQX JIANGH HAOJ J Effects of Bacillus velezensis strain BAC03inpromortingplantgrowth J Biologicalcontrol 201 6 98 1 8 26 1 7 羅 楚 翔 彭 建 楊 歡 等 煙 草 赤星病拮抗 芽胞桿菌的篩 選及 培 養(yǎng) 基 優(yōu) 化 J 中 國(guó) 煙 草 科 學(xué) 201 4 35 3 50 55 7 3 1 49 卷8 期 張 俊 慶 等 辣 椒 枯 萎 病 主 要 致 病 菌 的 分 離 鑒 定 及 農(nóng) 用 拮 抗 菌 篩 選